[发明专利]一种引发溶血性输血反应的类孟买表型的SNP位点、应用及试剂

权利要求书

1.FUT1基因的SNP位点，其特征在于，所述SNP位点包括(a)FUT1基因编码区起始密码子起的第575位c.575GC突变和第840位c.840GA突变，或者(b)FUT1基因编码区起始密码子起的第575位c.575GC突变；野生型FUT1基因编码区的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.FUT1基因的等位基因，其特征在于，所述FUT1基因的等位基因包括(a)FUT1基因编码区起始密码子起的第575位c.575GC突变和第840位c.840GA突变，或者(b)FUT1基因编码区起始密码子起的第575位c.575GC突变；野生型FUT1基因编码区的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。

3.权利要求1所述FUT1基因的SNP位点，或权利要求2所述FUT1基因的等位基因在(a)或(b)中的应用：

(a)类孟买血型鉴定；

(b)制备鉴定类孟买血型试剂。

4.检测权利要求1所述FUT1基因的SNP位点的第一试剂，其特征在于，所述第一试剂包括c.575GC突变的扩增引物对和c.840GA突变的扩增引物对；

优选地，所述第一试剂还包括内参基因的扩增引物对；

优选地，所述内参基因包括G6PD基因、GAPDH基因或^β-actin基因；

优选地，所述c.575GC突变的扩增引物对的正向扩增引物和反向扩增引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示；

优选地，所述c.840GA突变的扩增引物对的正向扩增引物和反向扩增引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示；

优选地，所述G6PD基因的扩增引物对的正向扩增引物和反应扩增引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.6和SEQ ID No.7所示。

5.检测权利要求2所述FUT1基因的等位基因的第二试剂，其特征在于，所述第二试剂包括FUT1基因的扩增引物对和测序引物对，所述FUT1基因的扩增引物对的扩增片段覆盖FUT1基因编码区起始密码子起的第575位和第840位；

优选地，所述FUT1基因的扩增引物对的正向扩增引物和反向扩增引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.8和SEQ ID No.9所示；

优选地，所述FUT1基因的测序引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.10和SEQ ID No.11所示。

6.权利要求4所述第一试剂和/或权利要求5所述第二试剂在类孟买血型鉴定中的应用。

7.类孟买血型鉴定试剂盒，其特征在于，所述类孟买血型鉴定试剂盒包括权利要求4所述第一试剂和/或权利要求5所述第二试剂。

8.类孟买血型鉴定方法，其特征在于，应用权利要求7所述试剂盒对待测血样进行扩增，扩增产物中含有权利要求1所述FUT1基因的SNP位点，或者权利要求2所述FUT1基因的等位基因时，确定待测血样的血型为类孟买血型。

9.根据权利要求8所述的类孟买血型鉴定方法，其特征在于，所述类孟买血型鉴定方法包括，分别采用权利要求4所述的第一试剂中的两对引物对对待测血样进行PCR-SSP检测，根据得到的对应扩增产物结果确定待测血样是否为类孟买血型；

优选地，两对引物对均未得到扩增产物时，确定待测血样不含有权利要求1所述的SNP位点或权利要求2所述的等位基因。

10.根据权利要求8所述的类孟买血型鉴定方法，其特征在于，所述类孟买血型鉴定方法包括，采用权利要求5所述的FUT1基因的扩增引物对对待测血样进行PCR扩增，而后采用权利要求5所述的FUT1基因的测序引物对对扩增产物进行测序，确定待测血样的是否为类孟买血型；优选地，所述类孟买血型鉴定方法还包括单倍型分型测序。