[发明专利]一种辅酶Q10分离提纯的方法

说明书

本发明提供了一种辅酶Q10分离提纯的方法，包括如下步骤：S1步骤：将辅酶Q10粗品溶液进行一级正相层析，得到中间产物A；S2步骤：将中间产物A进行二级正相层析，得到中间产物B，中间产物B经结晶和干燥后得到辅酶Q10中间体；S3步骤：将辅酶Q10中间体溶解后进行反相层析，然后结晶和干燥得到纯化后的辅酶Q10纯品，通过该方法明显提高了辅酶Q10的纯度和收率，降低杂质含量。

技术领域

本发明涉及化合物提纯技术领域，具体涉及一种辅酶Q10分离提纯的方法。

背景技术

辅酶Q10(coenzyme Q10，UQ)是生命体必要的重要元素之一，在呼吸过程中是发挥着电子和质子的传递体的重要作用，具有增强机体免疫力、延缓衰老和提高人体活力等功效，几乎没有毒副作用，因此在医学领域得到较好的应用，尤其是心血管系统疾病的治疗。随着辅酶Q10的研究不断地深入，其在营养保健品、食品添加剂和化妆品行业也得到广泛应用。

辅酶Q10分离提纯过程中，常见的萃取方法有：溶剂浸提法、超声波提取法、微波提取法和酶提取法、超临界流体萃取法等。但在常用萃取方法中，只有溶剂浸提法常用天然产物的提取生产，这种萃取方法不仅有溶剂残留，萃取效率较低，且生产成本较高。

虽然目前辅酶Q10分离纯化技术有涉及膜分离技术，但只是对含有辅酶Q10的溶液进行简单过滤，去除分子量大或微小的不溶杂质，均未对辅酶Q10溶液进行浓缩富集，往往需要继续进行多次结晶，导致结晶过程中辅酶Q10的损失。

目前多数辅酶Q10的分离提纯方法，因操作难度较大，纯度较低，杂质含量过大，产品收率较低等，导致无法实现工业化生产。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的产品纯度较低，杂质含量过大，收率较低的缺陷，从而提供一种辅酶Q10分离提纯技术方法。

为此，本发明提供了一种辅酶Q10分离提纯的方法，包括如下步骤：

S1步骤：将辅酶Q10粗品溶液进行一级正相层析，得到中间产物A；

S2步骤：将中间产物A进行二级正相层析，得到中间产物B，中间产物B经结晶和干燥后得到辅酶Q10中间体；

S3步骤：将辅酶Q10中间体溶解后进行反相层析，然后结晶和干燥得到纯化后的辅酶Q10纯品。

进一步地，所述一级正相层析采用的洗脱剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、丁酮、乙醇和正己烷中的一种或者多种，优选为乙酸乙酯。

进一步地，所述二级正相层析采用的洗脱剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、丁酮、乙醇和正己烷中的一种或者多种；优选为体积比为10：90-50：50的二甲基甲酰胺和二甲基亚砜。

进一步地，所述一级正相层析和/或二级正相层析采用的色谱柱选自Silica色谱柱、脱活silica色谱柱、NH₂色谱柱、HILIC色谱柱或者超顺磁性硅胶柱；优选的，所述二级正相层析采用的色谱柱为超顺磁性硅胶柱。

进一步地，所述反相柱层析采用的色谱柱的填料的键合相为C18色谱柱、C18-P色谱柱、ASB-C18色谱柱、C8色谱柱、C4色谱柱、HLP色谱柱、苯基硅烷键合硅胶柱中的一种或者多种。

进一步地，所述反相柱层析采用的洗脱剂选自甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、苯、甲基叔丁基醚、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二丁醚和苯乙酮中的一种或多种；优选的，所述反相层析采用的洗脱剂选自体积比为45:55-55:45的丙酮和甲基叔丁基醚或者体积比为45:55-55:45的正己烷和苯。

进一步地，所述一级正相层析、二级正相层析或反相层析采用的色谱柱至少有1根。例如2～6根。

进一步地，所述一级正相层析或者二级正相层析采用的色谱柱的填料粒径为5～60μm。