[发明专利]基于多基团修饰磁珠和荧光量子点检测古代丝织品的方法

权利要求书

1.一种基于多基团修饰磁珠和荧光量子点检测古代丝织品的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)取古代丝织品40-50mg，捣碎，用5-6mL氯化钙、水和乙醇的混合液溶解并混合摇匀，得到溶解液；

2)将溶解液置于55-70℃水浴中0.5-1.5小时，离心处理；

3)吸取上清液到截留分子量为800-1200Da的透析膜中透析；

4)取透析后的溶液，在-50℃至-87℃、2-8Pa条件下离心冷冻干燥，得到丝素蛋白；

5)取丝素蛋白，加入裂解液进行裂解，混合均匀，得到裂解液，冷藏备用；

6)取含有羧基和氨基共修饰磁珠的缓冲液加入到裂解液中，混合均匀，静置吸附后，得到含有丝素蛋白-磁珠复合物的分散液，冷藏备用；

7)在外加磁场下分离得到沉淀物，用乙醇溶液进行清洗，得到丝素蛋白-磁珠复合物，冷藏备用；

8)向离心管加入含有链霉亲和素化的荧光量子点溶液，再加入生物素化丝素蛋白抗体，振荡孵育，得到荧光量子点标记的生物素化丝素蛋白抗体复合物分散液；

9)将丝素蛋白-磁珠复合物加入荧光量子点标记的生物素化的丝素蛋白抗体复合物分散液中进行反应，离心洗涤，再分散于磷酸盐缓冲溶液中，得到待测样本；用激光照射待测样本，以是否发生荧光来判断待测样本中是否含有丝素蛋白。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中，氯化钙、水和乙醇的摩尔比为1:(7-9):(1.5-2.5)，溶解温度为96-99℃，溶解时间为1-2小时。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中，离心转速为10000-12000转/分，离心时间为5-10分钟。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)中，透析过程中每4-6小时换一次水，透析24-48小时以除去溶解液中的钙离子和氯离子。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4)中，冷冻干燥时间为20-40小时。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤5)中，裂解液为含3-5wt％SDC、pH＝8.0的Tris-HCl溶液，丝素蛋白的浓度为1-1.5mg/mL。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤6)中，吸附时间为2-5分钟。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤7)中，乙醇溶液的浓度为60-80wt％。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤8)中，振荡孵育的温度为20-50℃，时间为10-20分钟。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤9)中，反应时间为10-30分钟，磷酸盐缓冲液的pH＝5-8。