[发明专利]一种梣酮-血蓝蛋白免疫原及其多克隆抗体与制备方法、应用在审
申请号: | 202310277928.3 | 申请日: | 2023-03-21 |
公开(公告)号: | CN116425861A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 潘洁;郑江;李维维;胡紫霞;伍楚天 | 申请(专利权)人: | 贵州医科大学 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/107;C07K16/16;G01N33/53;G01N33/68 |
代理公司: | 贵州派腾知识产权代理有限公司 52114 | 代理人: | 龙远宁 |
地址: | 550004 *** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 免疫原 及其 克隆 抗体 制备 方法 应用 | ||
1.一种梣酮-血蓝蛋白免疫原,其特征在于,是选择高免疫原性的血蓝蛋白作为载体蛋白,与梣酮化学合成得到。
2.根据权利要求1所述的免疫原,其特征在于,所述梣酮-血蓝蛋白免疫原,是通过如下方法制备得到:取梣酮,加入丙酮,充分溶解后,再加入DMDO,室温搅拌反应,37℃下N2流吹干,残渣加入Native KLH溶液,常温搅拌反应1,即得免疫原FRA-KLH。
3.根据权利要求2所述的免疫原,其特征在于,所述步骤具体如下:精密称取梣酮7.3mg,加入丙酮750μL,充分溶解后,再加入DMDO1.5mL,室温搅拌反应30min,37℃下N2流吹干,残渣加入NativeKLH溶液1.48mL,常温搅拌反应1h,即得免疫原FRA-KLH。
4.一种选择性识别梣酮-蛋白共价结合物的多克隆抗体,其特征在于,采用权利要求1中所述的免疫原免疫动物后制备得到。
5.根据权利要求4所述的抗体,其特征在于,所述免疫动物后制备得到,是对家兔进行免疫接种后分离血清得到。
6.根据权利要求4所述的抗体,其特征在于,所述抗体,是通过如下方法制备得到:对家兔进行免疫接种,家兔经背部随机10处注射1.0mL的免疫原乳剂,第一次免疫接种FCA-FRA-KLH,间隔7天,用FIA-FRA-KLH进行加强免疫,定时分离血清。
7.根据权利要求4所述的抗体,其特征在于,所述FCA-FRA-KLH,是采用弗氏完全佐剂的免疫原乳剂。
8.根据权利要求4所述的抗体,其特征在于,所述FIA-FRA-KLH是采用弗氏不完全佐剂的免疫原乳剂。
9.权利要求4所述抗体在特异性识别梣酮-蛋白加合物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述特异性识别梣酮-蛋白加合物中的应用,是对梣酮诱发肝损伤的蛋白靶点进行ELISA、Westernblot和免疫荧光检测方面的应用。
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