[发明专利]一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法

说明书

本发明公开了一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法，包括如下步骤：S1）材料活化、S2）材料悬浊、S3）检测样本孵育、S4）蛋白洗脱与酶解、S5）前处理、S6）检测。本发明的检测方法，降低了高丰度蛋白的干扰，能够使得检测的结果更为全面和准确，填补了体液中高密度低丰度蛋白质检测方法上的空白。

技术领域

本发明涉及检测领域，具体涉及一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法。

背景技术

人体体液中的蛋白质能够反映一个人的生理、病理情况，对体液蛋白进行检测能够对各类生理、病理的情况进行诊断。现有的体液蛋白检测方法中，基于质谱的高通量蛋白组学定量分析是目前检测的优选方案之一，但是受制于体液蛋白丰度波动范围大，传统的质谱检测方法只能检测到数百个体液当中的高丰度蛋白，不能够准确检测和反映体液蛋白组的变化水平，如：

【1】Geyer, P. E., Holdt, L. M., Teupser, D.Mann, M. Revisitingbiomarker discovery by plasma proteomics. Mol. Syst. Biol. 13, 942 (2017)；

【2】Geyer, P. E. et al. Plasma proteome profiling to assess humanhealth and disease. Cell Syst. 2, 185–195 (2016)；

【3】Crutchfield, C. A., Thomas, S. N., Sokoll, L. J.Chan, D. W.Advances in mass spectrometry-based clinical biomarker discovery. Clin.Proteom. 13, 1(2016)；

【4】Keshishian, H. et al. Quantitative, multiplexed workflow for deepanalysis of human blood plasma and biomarker discovery by mass spectrometry.Nat. Protoc. 12, 1683–1701 (2017)；

【5】Cao, Z., Tang, H.-Y., Wang, H., Liu, Q.Speicher, D. W. Systematiccomparison of fractionation methods for in-depth analysis of plasmaproteomes. J. Proteome Res. 11, 3090–3100 (2012)；

【6】Gillette, M. A.Carr, S. A. Quantitative analysis of peptides andproteins in biomedicine by targeted mass spectrometry. Nat. Methods 10, 2 8–34 (2013).

【7】Picotti, P., Bodenmiller, B.Aebersold, R. Proteomics meets thescientific method. Nat. Methods 10, 2 4–27 (2013)；

从如上列举的文献可知，传统的质谱检测方法只能检测到数百个体液当中的高丰度蛋白（如文献4-7），不能够全面、准确的反应体液蛋白组的变化水平，尤其是高密度的低丰度蛋白的真实情况，而这部分蛋白是往往是生理病理状态的重要反映指标。因此，对体液蛋白中该群体蛋白的检测，有利于对疾病的发生发展更深入的了解。有鉴于此，亟需一种能够对体液中的高密度低丰度蛋白进行检测的方法，以更好的应用在体液蛋白检测以及生理病理相关指标信息的获取中。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术中不足，提供一种能够更为全面的检测体液中高密度低丰度蛋白的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案实现：

一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法，包括如下步骤：