[发明专利]一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液及其制备方法，外泌体滴眼液的原料成分包括以下质量分数的组分：间充质干细胞外泌体2％～8％、维生素E 0.2％～0.8％、玻璃酸钠0.5％～1.5％、卡波姆0.1％～0.5％。该滴眼液具有抑制炎症反应，保护神经细胞，减轻各种原因导致的视网膜损伤，促进视神经细胞的神经突生长和功能恢复，缓解眼疲劳，改善视网膜血液循环等显著功效；此外，该滴眼液不含防腐剂、激素等成分，可长期使用，不刺激，无副作用。

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，尤其涉及一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液及其制备方法。

背景技术

视神经属于中枢神经系统的一部分，由视网膜神经节细胞的胞体及轴突所组成，可将视网膜收集到的视觉信息传递至大脑皮层。视神经损伤作为常见眼部疾患，通常由外伤、遗传和一些病理因素，如青光眼、糖尿病、视网膜血管阻塞、缺血性视神经病变、视神经炎等引起，可导致视功能不可逆受损甚至失明。造成视神经损伤的病因和发病机制复杂，目前，治疗上没有明确、统一、公认的治疗方案。现有的治疗主要包括：对因治疗、药物治疗、中医治疗、联合用药、视神经鞘减压术、辅助治疗及外泌体治疗。

间充质干细胞外泌体(MSCs-Exo)是一种携带DNA、miRNA、蛋白质等成分的细胞外囊泡。研究证实，MSCs-Exo可以抑制炎症反应，保护神经细胞，减少神经细胞的损坏和凋亡，同时可以促进血管的新生，运送营养物质、生长因子等，促进视神经细胞的神经突生长和功能恢复。同时间充质干细胞外泌体有药物载体性、靶向性、良好的组织相容性及避免全身的排斥反应，因此其在视神经损伤相关研究具有广阔的研究前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液及其制备方法，以减轻各种原因导致的视网膜损伤，促进视神经细胞的神经突生长和功能恢复，缓解眼疲劳，改善视网膜血液循环。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明第一方面提供了一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液，其原料成分包括以下质量分数的组分：间充质干细胞外泌体2％～8％、维生素E 0.2％～0.8％、玻璃酸钠0.5％～1.5％、卡波姆0.1％～0.5％。

进一步的，间充质干细胞外泌体的质量分数是间充质干细胞外泌体3％、维生素E0.5％、玻璃酸钠0.7％、卡波姆0.1％

进一步的，间充质干细胞外泌体的质量分数是间充质干细胞外泌体5％、维生素E0.5％、玻璃酸钠0.7％、卡波姆0.1％。

进一步的，还包括质量分数是0.1％～3.0％的生理盐水。

进一步的，还包括质量分数是86.2％～97.5％的注射用水。

本发明的第二方面提供了一种用于治疗视神经损伤的外泌体滴眼液的制备方法，包括如下步骤：

S1、间充质干细胞的培养：人脐带间充质干细胞MSCs以1×10⁵/cm²的密度接种于培养瓶中，培养基用完全间充质干细胞培养基，将细胞培养瓶置于37℃、5％CO₂孵育箱中培养；

倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化，待细胞长至培养瓶底60％面积时，换液培养，加无血清间充质干细胞培养液，48h后，收集培养上清液，合并于4℃冷藏备用；

S2、外泌体的提取：将人脐带间充质干细胞MSCs培养上清液收集至50mL离心管中，4℃、300g离心10min，以去除死细胞；将上清液转移至新的离心管中，4℃、2000g离心10min，以去除大的细胞碎片；将上清液转移至新的离心管中，4℃，10000g离心30min，以去除细胞器及小颗粒；