[发明专利]疮痂链霉菌噬菌体φS102的应用

说明书

本发明涉及一种长尾宽宿主谱链霉菌强裂解性噬菌体及其在防治马铃薯疮痂病药物中的应用。本发明所述的长尾宽宿主谱链霉菌强裂解性噬菌体，属于长尾噬菌体科，对宽宿主谱链霉菌具有较强的裂解性，效价高。本发明所述的长尾宽宿主谱链霉菌强裂解性噬菌体用于防治马铃薯疮痂病，安全性好，效果好，无污染。所述噬菌体防治马铃薯疮痂病的实验结果表明：对照组结痂病变覆盖率平均为28.5％左右，相比之下，噬菌体处理组的块茎后代的病变覆盖率仅为3.5％，显著降低(p0.05)。通过噬菌体处理，每个块茎的损伤类型和损伤数量也显著减少(p0.05)。噬菌体处理和未处理的块茎在块茎重量、大小或数量上没有显著差异。

本发明为“一种长尾宽宿主谱链霉菌强裂解性噬菌体及其在防治马铃薯疮痂病药物中的应用(申请号2021106907012，申请日：2021年06月22日)”的分案申请。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种疮痂链霉菌噬菌体的应用。

背景技术

马铃薯疮痂病是由病原链霉菌(S.scabies、S.galilaeus、S.bobili等)引起的植物性病害，其危害马铃署块茎，导致块茎表面出现近圆形至不定形木栓化疮痂状淡褐色病斑或斑块，手摸质感粗糙；通常病斑仅限于皮层，有时匍匐茎也可受害，使被害薯块质量和产量降低，不耐贮藏，且病薯外观不雅，商品品级大为下降。虽然通过实施合理布局、推广抗病品种、种薯处理、切刀消毒、建立种薯田、中耕培土、喷药保护等综合防治措施，能使马铃薯细菌性病害得到有效控制，但多个环节的处理一方面加大了劳动强度，使产业成本居高不下；另一方面，农药的大量使用造成了超级抗药菌的出现和环境的严重污染以及商品薯农药残留超标等多种问题，故为了支撑国家马铃薯主粮化战略及马铃薯产业的健康发展，亟需研制高效、安全、环保的用于马铃薯细菌病害防控的新技术及新药剂。

噬菌体是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，在数目上超出细菌十倍左右。目前，噬菌体有望作为抗菌剂替代抗生素和农药以解决日益严重的病原细菌耐药性问题；同时，由于噬菌体具备特异性强、易于分离和增值、遗传毒性低、耐受食品加工环境等特点，也被期望作为一种理想的生物防腐剂或检测手段用于诸多领域。噬菌体增殖快，定殖病原宿主后，就不需要再次补充噬菌体。病原菌感染了相应的某种噬菌体后，可能会像患了恶性肿瘤一样，无法治愈，这样就可以把原来不属于某个地方的相应的病害根除，维持当地原有的生态环境。相比于采用农药控制病害的扩展和蔓延，不论是从环境友好性，还是减少生产成本方面来说，噬菌体是一种更好生物防治方法。

发明内容

为了解决现有技术存在的以上问题，本发明提供了一种安全、有效、无污染的噬菌体及其在防治马铃薯疮痂病药物中的应用。所述噬菌体属于长尾噬菌体科，对宽宿主谱链霉菌具有较强的裂解性，效价高。

本发明所采用的技术方案为：

疮痂链霉菌噬菌体(Streptomyces phage)该菌株于2021年4月15日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉.武汉大学，邮编430072)，保藏编号为CCTCCNO:M 2021379。

所述噬菌体具有呈多面体的头部结构和无收缩性的尾部，头部直径约64±7nm，尾部长约196±8nm，所述噬菌体属于长尾噬菌体科。

所述噬菌体在pH为2-10范围内具有活性，所述噬菌体在30℃-80℃时活性稳定，大于80℃则失活。

所述噬菌体的潜伏期为20min，爆发期为60min。

所述噬菌体在MOI为0.01时，其效价为1.47×10⁷。

所述的长尾宽宿主谱链霉菌强裂解性噬菌体的分离纯化方法，具体如下：

(1)样品前处理：