[发明专利]一种双胞山药的增殖诱导快繁方法

说明书

本发明公开了一种双胞山药的增殖诱导快繁方法，其方法是先取双胞山药的薯块或零余子萌发的幼嫩茎段作为外植体，将双胞山药外植体进行消毒、增殖培养、生根诱导培养和幼苗移栽，移栽的幼苗经5个月生长后，部分幼苗可结双胞薯块。本发明通过调节两种常用激素的使用量进行全程诱导，方法简单，操作简便，生产成本低。快繁体系可诱导试管苗繁殖双胞试管薯，诱导率可达80%，繁殖系数高，移栽的幼苗经5个月生长后，部分幼苗可结双胞薯块。

技术领域

本发明属植物组织培养领域，具体涉及一种双胞山药的增殖诱导快繁方法。

背景技术

山药(Dioscoreaopposita)是薯蓣科薯蓣属一年生或多年生藤本植物的块茎，因其富含多种营养元素和保健成分，深受消费者喜爱。双胞山药具有高产、易栽培、品质好、适于加工等优点，随着市场需求量的逐年攀升，双胞山药种植经济效益逐渐凸显，近年已逐步成为贵州省多地农田增量、农民增收的亮点产业。然而山药传统的芦头繁殖法存在着用种量大、病害易积累、种薯发芽不齐等缺点，制约着双胞山药的生产与推广。山药快繁技术不仅能够加快优良种薯的繁育速度，也是脱毒种薯生产不可或缺的一环。研究双胞山药快繁体系条件不但能推动贵州山药产业的壮大，也能为其脱毒种薯的生产提供理论借鉴。国内外对山药的研究主要集中于食品加工、病虫害防控、次生代谢产物提取与活性分析等方面，而目前山药快繁体系优化研究主要集中于少数主栽品种上，对新兴特色品种双胞山药的快繁技术研究较少。而双胞山药的尿囊素和多糖含量均显著高于市售山药品种，双孢山药其可溶性糖、铁、铜含量相对丰富。双胞山药干片和脆片产品含油率、色泽及剪切力适中，口感酥脆，风味特别，感官评分较高，适用于脆片加工。

目前未有双胞山药的快繁技术方面的研究，只对紫山药、花籽山药、铁棍山药、惠楼山药、淮山药等快繁技术进行了研究与优化。因不同的山药的生长环境不同，山药本身的有效物质也不同，导致不同山药的快繁技术不同，张丽霞等研究表明在液体MS培养基中添加KT(2.0mg·L^-1)+NAA(0.02mg·L^-1)+PP333(0.1mg·L^-1)适合花籽山药茎段的繁殖。平阿敏等研究铁棍山药茎尖茎段诱导成苗，结果表明添加6-BA(0.5mg·L^-1)+NAA(0.5mg·L^-1)最适合茎尖成苗，添加6-BA(0.5mg·L^-1)+NAA(0.1mg·L^-1)最适合茎段侧芽成苗。王葡萄等研究表明，南城淮山茎蔓腋芽在添加6-BA(1.0mg·L^-1)+NAA(0.1mg·L^-1)的MS培养基中成苗率可达80％，添加6-BA(2.0mg·L^-1)+NAA(0.2mg·L^-1)+活性炭(1.5g·L^-1)为最适增殖配方，蘸取100mg·L^-1NAA溶液生根率可达96.7％。李瑞雪^[7]等以铁棍山药为材料，得出添加TDZ(1.0mg·L^-1)适合原球茎的诱导，增殖阶段宜添加6-BA(9.0mg·L^-1)，KT(2.0mg·L^-1)+NAA(0.02mg·L^-1)适合原球茎的分化，1/4MS中添加NAA(0.05mg·L^-1)+PP333(1.0mg·L^-1)为最适生根培养基。前期对不同山药快繁体系的研究结果表明，不同的山药种间快繁体系存在一定的差异。现有专利中也未对双胞山药的快繁技术进行报道，如专利(CN105145373A)一种利川山药组培快繁方法，报道的是利川山药，其组培快繁技术也与本申请的双胞山药的快繁技术有所不同。

本研究以特色品种双胞山药为试验材料，以外植体、激素配比、基质配比等为试验因素，探索双胞山药最适的消毒、增殖、生根诱导以及幼苗移栽等条件，优化双胞山药的快繁体系，为双胞山药的脱毒苗规模化生产提供理论参考依据。

发明内容