[发明专利]一种用于禽类原始生殖细胞建系的成纤维细胞生长因子组合

权利要求书

1.成纤维细胞生长因子的组合在禽类原始生殖细胞(例如雌性原始生殖细胞和雄性原始生殖细胞)建系中的应用，所述成纤维细胞生长因子的组合为酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的组合。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述禽类为鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽子、火鸡、野生鸟类(如中华鹧鸪或斑纹鸨)；优选地，所述禽类为鸡，例如种鸡，如肉鸡种鸡、蛋鸡种鸡、或地方品种鸡。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述成纤维细胞生长因子的组合进一步与干细胞因子(SCF)联合使用。

4.一种用于培养禽类原始生殖细胞(例如雌性原始生殖细胞和雄性原始生殖细胞)的培养体系，所述培养体系包含酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、以及任选的干细胞因子(SCF)。

5.根据权利要求4所述的培养体系，其特征在于，所述酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的终浓度为10-100ng/mL，所述碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的终浓度为4-10ng/mL，所述干细胞因子(SCF)的终浓度为4-10ng/mL。

6.根据权利要求5所述的培养体系，其特征在于，所述酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的终浓度为50ng/mL，所述碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的终浓度为10ng/mL，所述干细胞因子(SCF)的终浓度为6ng/mL。

7.根据权利要求4-6中任一项所述的培养体系，其特征在于，所述培养体系还包含KO-DMEM、大鼠肝细胞KO-DMEM的条件培养液、胎牛血清、鸡血清、谷氨酰胺、非必需氨基酸、丙酮酸钠、β-巯基乙醇、青霉素/链霉素；优选地，所述培养体系还包含46％KO-DMEM、40％大鼠肝细胞KO-DMEM的条件培养液、7.5％胎牛血清、2.5％鸡血清、1％谷氨酰胺、1％非必需氨基酸、1％丙酮酸钠、0.1％β-巯基乙醇、1％青霉素/链霉素，其中所述百分比是指终浓度体积百分比。

8.根据权利要求4-7中任一项所述的培养体系，其特征在于，所述禽类为鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽子、火鸡、野生鸟类(如中华鹧鸪或斑纹鸨)；优选地，所述禽类为鸡，例如种鸡，如肉鸡种鸡、蛋鸡种鸡、或地方品种鸡。

9.一种禽类原始生殖细胞(例如雌性原始生殖细胞和雄性原始生殖细胞)建系的方法，所述方法包括使用权利要求4-8中任一项所述的培养体系培养禽类原始生殖细胞的步骤。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述禽类为鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽子、火鸡、野生鸟类(如中华鹧鸪或斑纹鸨)；优选地，所述禽类为鸡，例如种鸡，如肉鸡种鸡、蛋鸡种鸡、或地方品种鸡。