[发明专利]一种甲型流感病毒核酸检测试剂、试剂盒及应用在审
| 申请号： | 202310089534.5 | 申请日： | 2023-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN116334310A | 公开（公告）日： | 2023-06-27 |
| 发明（设计）人： | 陈海琴;陈冬冬;曾彦达;李翔;童本福;潘为民 | 申请（专利权）人： | 江苏美克医学技术有限公司;南京美捷医疗有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12N15/11;C12Q1/686;G01N33/558;G01N33/543;C12R1/93 |
| 代理公司： | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人： | 曹慧萍 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市江北新区新*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 流感病毒 核酸 检测 试剂 试剂盒 应用 | ||
1.一种用于检测甲型流感病毒靶标序列的引物组合在制备甲型流感病毒核酸检测试剂中的应用，其特征在于：
所述靶标序列为甲型流感病毒M1基因上CDS区域中第79-338位核苷酸序列，其中，F3区为第79-101位核苷酸序列，F2区为第122-143位核苷酸序列，F1区为第173-196位核苷酸序列，B1c区为第221-242核苷酸序列，B2c区为第276-297核苷酸序列，B3c区为第317-338位核苷酸序列；
引物组合包括外引物对FluA F和FluA B、内引物对FluA FIP和FluABIP以及环引物对FluA LF和FluA LB，其中，FluA F具有与F3区相同的核苷酸序列，FluA B具有与B3c区反向互补的核苷酸序列；FluA FIP具有F1区反向互补的核苷酸序列以及与F2区相同的核苷酸序列，FluA BIP具有与B1c区相同的核苷酸序列以及与B2c区反向互补的核苷酸序列；环引物对FluA LF和位于F2区位和F1区之间的第148-168的核苷酸序列反向互补、FluA LB和位于B1c区和B2c区之间的第250-261位的核苷酸序列相同。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
外引物对FluA F和FluAB的碱基序列如SEQ ID NO:1-2所示；
内引物对FluA FIP和FluABIP的碱基序列如SEQ ID NO:3-4所示；
环引物对FluA LF和FluALB的碱基序列如SEQ ID NO:5-6所示；
其中，FluA FIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LF的5’端标记有生物素Biotin，或者FluAFIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LB的5’端标记有生物素Biotin，或者FluABIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LB的5’端标记有生物素Biotin。
3.一种用于甲型流感病毒核酸检测的试剂，其特征在于：至少包括用于检测甲型流感病毒靶标序列的引物组合；其中，所述靶标序列为甲型流感病毒M1基因上CDS区域中第79-338位核苷酸序列，其中，F3区为第79-101位核苷酸序列，F2区为第122-143位核苷酸序列，F1区为第173-196位核苷酸序列，B1c区为第221-242核苷酸序列，B2c区为第276-297核苷酸序列，B3c区为第317-338位核苷酸序列；
引物组合包括外引物对FluA F和FluA B、内引物对FluA FIP和FluABIP以及环引物对FluA LF和FluA LB，其中，FluA F具有与F3区相同的核苷酸序列，FluA B具有与B3c区反向互补的核苷酸序列；FluA FIP具有F1区反向互补的核苷酸序列以及与F2区相同的核苷酸序列，FluA BIP具有与B1c区相同的核苷酸序列以及与B2c区反向互补的核苷酸序列；环引物对FluA LF和位于F2区位和F1区之间的第148-168的核苷酸序列反向互补、FluA LB和位于B1c区和B2c区之间的第250-261位的核苷酸序列相同。
4. 根据权利要求3所述的用于甲型流感病毒核酸检测的试剂，其特征在于：外引物对FluA F和FluA B的碱基序列如SEQID NO:1-2所示；
内引物对FluA FIP和FluABIP的碱基序列如SEQ ID NO:3-4所示；
环引物对FluA LF和FluALB的碱基序列如SEQ ID NO:5-6所示；
其中，FluA FIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LF的5’端标记有生物素Biotin，或者FluAFIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LB的5’端标记有生物素Biotin，或者FluABIP的5’端标记有FITC或FAM基团、FluA LB的5’端标记有生物素Biotin。
5.一种甲型流感病毒核酸检测试剂盒，包括权利要求3-4任一项所述的用于甲型流感病毒核酸检测的试剂。
6.根据权利要求5所述的甲型流感病毒核酸检测试剂盒，其特征在于：所述核酸检测试剂盒还包括环介导等温扩增反应液和检测卡。
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