[发明专利]一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法在审
| 申请号： | 202310081396.6 | 申请日： | 2023-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN115950870A | 公开（公告）日： | 2023-04-11 |
| 发明（设计）人： | 龚春梅;唐磊;章小燕;白娟;李佳阳;李晓飞;张培良 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01B11/30;G01B11/02;G01B11/28;G01B11/24;G01B11/12;G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 田立媛 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 荧光显微镜 观察 茶树 表皮 气孔 形态 方法 | ||
1.一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取样：采摘新鲜健康带叶的当年生枝条，切取块状样品；
(2)固定处理：将切割的样品材料置于0.8～2mL固定液中，固定至样品完全脱色；
(3)漂洗：将样品从固定液中取出，用水漂洗1分钟；
(4)透明处理：将固定好的材料转移至0.8～2mL透明液中，过夜后获得完全透明的样品材料；
(5)观察：将样品材料有表皮毛的一面朝上平铺于载玻片上，在样品上方滴适量浓度为5％～20％的稀甘油，盖上盖玻片，轻轻压平，在荧光显微镜下观察并拍照；
(6)统计：利用Image J软件统计表皮毛粗度，长度和密度以及不同类型的表皮毛基部，同时也可统计气孔总数和开张气孔数、气孔长度、宽度、面积与气孔的孔径开度。
2.根据权利要求1所述的一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法，其特征在于，步骤(1)所述块状样品的大小为2-20mm2。
3.根据权利要求1所述的一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法，其特征在于，步骤(1)所述块状样品的切取方法为：
取一颗生长饱满的芽，对称切开取一半；
或沿着叶脉，取二叶叶片半片叶的尖部；
或沿着叶脉，取三叶叶片半片叶的中部；
或沿着叶脉，取四叶叶片半片叶的基部；
或沿着一茎表皮切下样品。
4.根据权利要求1所述的一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法，其特征在于，步骤(2)所述固定液体积比为无水乙醇：乙酸＝3～9：1。
5.根据权利要求1所述的一种利用荧光显微镜观察茶树表皮毛和气孔形态的方法，其特征在于，步骤(4)所述透明液体积比为水合氯醛溶液：水：甘油＝8～10：1～2.5：1。
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