[发明专利]一种检测CTC抵抗NK细胞杀伤的试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202310079684.8 | 申请日： | 2023-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN116125078A | 公开（公告）日： | 2023-05-16 |
| 发明（设计）人： | 郭玮;王蓓丽;杨文静;孙云帆 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属中山医院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/58;G01N1/30;G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人： | 翁若莹 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 ctc 抵抗 nk 细胞 杀伤 试剂盒 及其 应用 | ||
1.检测试剂在制备用于检测CTC抵抗NK细胞杀伤的试剂盒中的应用，其特征在于，所述检测试剂至少包括：用于检测CTC标志物EpCAM、Pan-CK的试剂，用于检测白细胞标志物CD45的试剂，用于检测细胞核标志物DAPI的试剂，用于检测血小板标志物CD41的试剂，以及免疫抑制性检查点一抗CD155。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂具体包括：Alexa Fluor 555标记的Pan-ck，PE标记的EpCAM一抗混合物，Alexa Fluor 647标记的CD45一抗，FITC标记的CD155一抗，Alexa Fluor 647标记的CD41一抗，和细胞核染液DAPI。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂的浓度分别为：0.1mg/mLAlexa Fluor 555标记的Pan-ck，0.1mg/mL PE标记的EpCAM一抗混合物，0.1mg/mL AlexaFluor 647标记的CD45一抗，0.25μg/100μL FITC标记的CD155一抗、Alexa Fluor 647标记的CD41一抗，8.4μM细胞核染液DAPI。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括：含0.2％多聚甲醛固定剂、含0.3％皂苷及0.5％牛血清白蛋白的破膜剂、含20％的牛血清白蛋白的封闭液、以及含0.1％防腐剂的细胞洗液。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测试剂用于单个样本检测的抗体用量为：45μL Pan-ck一抗、2μL EpCAM一抗、45μL CD45一抗、5μL CD155一抗、10μL CD41一抗和100μL细胞核染液DAPI。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述固定剂、破膜剂和细胞洗液的用量分别为：200μL、100μL、10mL。
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