[发明专利]头孢菌素C的发酵方法

说明书

本发明公开了头孢菌素C的发酵方法，包括：步骤一、取顶头孢霉菌，制备一级种子、二级种子；步骤二、取步骤一所得二级种子，接种至顶头孢霉菌发酵培养基中发酵；其中，步骤二中，在发酵过程的以下时间段内补入葡萄糖溶液、植物油和环糊精/植物油乳液，工艺如下：葡萄糖溶液：40～80h，连续流加4～11g/L·h；80～130h，连续流加9～20g/L·h；植物油：50～90h，连续流加3～5g/L·h；90～120h，连续流加3～5g/L·h；环糊精/植物油乳液：90～120h，连续流加1～3g/L·h；本发明通过环糊精对植物油进行包合，能使植物油缓慢释放出来，进而避免油脂浓度过高导致发酵液供氧速率降低。

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及头孢菌素C的发酵方法。

背景技术

头孢菌素C，其钠盐二水物为单斜晶体。溶于水，不溶于乙醇、乙醚。当水溶液pH为2.5-8时稳定。主要作为制备7-氨基头孢霉烷酸(7-ACA)的中间体。

头孢菌素C在发酵过程中，需要补充足够的碳源，油脂是常用的碳源，其有利于头孢菌素C前体氨基酸的合成，进而可以促进头孢菌素C的合成，且同时兼作消沫剂，但其难溶于发酵液，过高浓度的油脂会导致发酵液供氧速率降低，因此会影响到菌体的生长，最终导致产物得率下降。且到发酵后期，液面容易产生泡沫，由于豆油消沫效果较差，需要补加较多的豆油才能有效的控制液面，同时由于菌体开始衰老自溶，对豆油的利用能力下降，残留在发酵液中过多的豆油会对头孢菌素C的提取造成影响。

发明内容

本发明的目的是提供头孢菌素C的发酵方法，通过环糊精对植物油进行包合，能使植物油缓慢释放出来，进而避免油脂浓度过高导致发酵液供氧速率降低，且以纳米纤维素作为规整剂，能通过排空作用使环糊精包合物的界面膜由疏松变得紧实，从而明显提高界面膜的粘弹性和有效抑制乳液的絮凝，进而提高乳液的稳定性。

为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了头孢菌素C的发酵方法，包括：

步骤一、取顶头孢霉菌，制备一级种子、二级种子；

步骤二、取步骤一所得二级种子，接种至顶头孢霉菌发酵培养基中发酵，发酵时间为130h，0～40h的发酵温度为28℃，40～130h的发酵温度为25℃，pH为5.6；

其中，步骤二中，在发酵过程的以下时间段内补入葡萄糖溶液、植物油和环糊精/植物油乳液，工艺如下：

葡萄糖溶液：40～80h，连续流加4～11g/L·h；80～130h，连续流加9～20g/L·h；

植物油：50～90h，连续流加3～5g/L·h；90～120h，连续流加3～5g/L·h；

环糊精/植物油乳液：90～120h，连续流加1～3g/L·h；

其中，环糊精/植物油乳液的制备方法为：

步骤A、将0.72重量份的环糊精溶解于45重量份的水中，搅拌至完成溶解，得环糊精水溶液；

步骤B、向环糊精水溶液中加入10重量份的植物油，经混合、高速剪切乳化、高压均质，得环糊精初乳液；

步骤C、向环糊精初乳液中加入45重量份的浓度为0.3％的棉花纳米纤维素悬浮液，经高速剪切乳化、高压均质，得到环糊精/植物油乳液。

在另一种技术方案中，所述的头孢菌素C的发酵方法中，所述发酵培养基组成如下：