[发明专利]头孢菌素C的发酵方法在审
| 申请号: | 202310055595.X | 申请日: | 2023-01-17 |
| 公开(公告)号: | CN116426597A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
| 发明(设计)人: | 王福清;王福华;许荔新 | 申请(专利权)人: | 中科医药行业生产力促进中心有限公司 |
| 主分类号: | C12P35/06 | 分类号: | C12P35/06;C08B37/16;C12N1/14;C12R1/75 |
| 代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 卢富华 |
| 地址: | 100006 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 头孢菌素 发酵 方法 | ||
1.头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,包括:
步骤一、取顶头孢霉菌,制备一级种子、二级种子;
步骤二、取步骤一所得二级种子,接种至顶头孢霉菌发酵培养基中发酵,发酵时间为130h,0~40h的发酵温度为28℃,40~130h的发酵温度为25℃,pH为5.6;
其中,步骤二中,在发酵过程的以下时间段内补入葡萄糖溶液、植物油和环糊精/植物油乳液,工艺如下:
葡萄糖溶液:40~80h,连续流加4~11g/L·h;80~130h,连续流加9~20g/L·h;
植物油:50~90h,连续流加3~5g/L·h;90~120h,连续流加3~5g/L·h;
环糊精/植物油乳液:90~120h,连续流加1~3g/L·h;
其中,环糊精/植物油乳液的制备方法为:
步骤A、将0.72重量份的环糊精溶解于45重量份的水中,搅拌至完成溶解,得环糊精水溶液;
步骤B、向环糊精水溶液中加入10重量份的植物油,经混合、高速剪切乳化、高压均质,得环糊精初乳液;
步骤C、向环糊精初乳液中加入45重量份的浓度为0.3%的棉花纳米纤维素悬浮液,经高速剪切乳化、高压均质,得到环糊精/植物油乳液。
2.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述发酵培养基组成如下:
以去离子水为介质,花生粉28~38g/L、棉籽蛋白20~30g/L、谷朊粉35~45g/L、玉米浆40~60mL/L、葡萄糖6~8g/L、蔗糖16~18g/L、蛋氨酸11~15g/L、甲硫氨酸2~4g/L、大豆油80~100mL/L、消沫剂1~2mL/L、CaSO4 12~16g/L、(NH4)2SO4 10~20g/L、CaCO3 6~8g/L。
3.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述植物油为大豆油。
4.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述步骤B中,用高速剪切乳化剂在14000rpm下进行乳化处理2min,然后500bar高压均质8min。
5.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述步骤C中,用高速剪切乳化机在10000rpm下进行乳化处理4min,然后300bar高压均质5min。
6.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述二级种子按照20%的接种量接种至顶头孢霉菌发酵培养基中。
7.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,所述顶头孢霉菌为保藏号为ATCC36225的顶头孢霉菌。
8.如权利要求1所述的头孢菌素C的发酵方法,其特征在于,环糊精/植物油乳液:90~120h,连续流加2g/L·h。
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