[发明专利]扩增TCR α链和/或β链的引物组合及其应用

权利要求书

1.一种引物组合，其特征在于，所述引物组合包括逆转录引物组，所述逆转录引物组包括逆转录正向引物和逆转录反向引物；其中，所述逆转录正向引物包括5’-第一Read1序列-TTTCTTATTrGrG+G-3’，所述逆转录反向引物包括SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述引物组合还包括cDNA扩增引物组，所述cDNA扩增引物组包括cDNA扩增正向引物和cDNA扩增反向引物；其中，所述cDNA扩增正向引物包括第二Read1序列，所述cDNA扩增反向引物包括SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列；

其中，所述第二Read1序列与第一Read1序列相同或不同。

3.根据权利要求1或2所述的引物组合，其特征在于，所述引物组合还包括巢式PCR引物组，所述巢式PCR引物组包括第一轮巢式PCR引物组；所述第一轮巢式PCR引物组的正向引物包括第三Read1序列或包括5’-第一测序接头1-第四Read1序列-3’；所述第一轮巢式PCR引物组的反向引物包括第一轮α链的反向引物和/或第一轮β链的反向引物，所述第一轮α链的反向引物包括SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列，所述第一轮β链的反向引物包括SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列；

其中，所述第三Read1序列与第二Read1序列相同或不同；和/或，第四Read1序列与第三Read1序列相同或不同；

可选地，所述第一轮巢式PCR引物组的正向引物还包括载体片段序列；和/或

所述巢式PCR引物组还包括第二轮巢式PCR引物组，所述第二轮巢式PCR引物组的正向引物包括第五Read1序列或载体片段序列或第二测序接头1；所述第二轮巢式PCR引物组的反向引物包括第二轮α链的反向引物和/或第二轮β链的反向引物，所述第二轮α链的反向引物包括SEQ ID NO.9所示的核苷酸序列或包括5’-Read2序列1-Barcode-AGTCTCTCAGCTGGTACACG-3’，所述第二轮β链的反向引物包括SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列或包括5’-Read2序列2-Barcode-TCTGATGGCTCAAACACAGC-3’；

其中，所述第五Read1序列与第三Read1序列或第四Read1序列相同或不同，和/或，所述第一测序接头1与第二测序接头1相同或不同。

4.根据权利要求3所述的引物组合，其特征在于，所述巢式PCR引物组还包括第三轮巢式PCR引物组，所述第三轮巢式PCR引物组的正向引物包括第三测序接头1，所述第三轮巢式PCR引物组的反向引物包括测序接头2和Read2序列3；

其中，所述第三测序接头1与第二测序接头1相同或不同；

可选地，所述第一测序接头1、第二测序接头1和第三测序接头1各自独立地选自illumina测序的P5接头的至少部分序列，和/或，所述测序接头2选自illumina测序的P7接头的至少部分序列；

可选地，所述Read2序列1和Read2序列2相同或不同；和/或，Read2序列1、Read2序列2、Read2序列3各自独立的选自illumina测序的Read2的至少部分序列；和/或，Read2序列1和Read2序列3二者序列至少部分重叠；和/或，Read2序列2和Read2序列3二者序列至少部分重叠。