[发明专利]一种硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种硫化铜纳米酶‑抗菌肽‑透明质酸复合微针及其制备方法和应用。本发明以氯化铜和硫化钠为原料制备硫化铜纳米酶，以透明质酸钠和羧甲基纤维素钠为原料，同时负载硫化铜纳米酶和PAF26抗菌肽，再通过模板法成功制备了一种可降解的复合微针。通过实验研究证实，本发明的复合微针呈尖锐的四棱锥形状，具有良好的生物相容性和机械性能，能够有效突破角质层屏障，实现硫化铜纳米酶和PAF26的透皮递送和释放。所述复合微针不仅具有显著的抗真菌作用，能够有效抑制深层皮肤真菌感染，而且无耐药性产生，其在治疗深层皮肤真菌感染方面具有明显的优势和广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针及其制备方法和应用。

背景技术

真菌疾病每年影响全球约10亿人，并导致150多万人死亡。皮肤和软组织真菌感染被认为是世界上第四大最常见的健康疾病。皮肤深层真菌感染由于药物难以到达病灶，在治疗中面临巨大挑战。目前，治疗皮肤真菌感染主要是用外用乳膏、软膏和洗液等。虽然这些药物对皮肤浅表真菌感染有效，但由于药物透皮效率低，对皮肤深层真菌感染治疗效果较差。此外，真菌通常会形成生物膜，并对现有的抗真菌药物(如唑类、两性霉素B和多烯类)迅速产生耐药性。因此，开发新颖、高效、便捷的皮肤深层真菌感染治疗策略和制剂具有重要意义。

微针给药系统是一种能够突破角质层屏障且无痛的透皮给药技术，与传统的透皮给药策略相比，具有透皮效率高、患者依从性好、易于自主给药等优势。近年来，纳米酶作为一种特殊的纳米技术，以其良好的稳定性、低廉的生产成本和能模拟天然酶的活性等优点，在抗菌领域引起了人们广泛的关注。硫化铜纳米酶具有良好的类氧化酶和类过氧化物酶活性，可以通过产生活性氧达到有效的抗菌活性，并可避免耐药性。但硫化铜纳米酶产生的活性氧存在半衰期短、扩散困难等缺陷，限制了其应用。PAF26抗菌肽作为一种只有6个氨基酸残基的寡肽，具有良好的抗真菌和穿透细胞被膜的活性，而且不易产生耐药性。更重要的是，PAF26穿透细胞被膜(细胞壁和/或质膜)的能力可以促进硫化铜纳米酶生成的活性氧进入真菌，克服活性氧的缺陷。

发明内容

针对现有皮肤深层真菌感染局部用药存在的抗菌活性低、透皮效率差，给药频率高和易产生耐药性等不足。本发明的目的在于提供一种硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针，该复合微针不仅可以突破角质层屏障，将硫化铜纳米酶和PAF26抗菌肽递送至皮肤深层真菌感染部位，充分发挥两者的协同抗菌作用，并能够有效避免耐药菌株的产生。

本发明的另一目的在于提供硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针的制备方法。

本发明的另一目的在于提供硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种硫化铜纳米酶-抗菌肽-透明质酸复合微针，包括基质和同时负载在基质上的活性成分；所述基质为透明质酸钠和羧甲基纤维素钠；所述活性成分为硫化铜纳米酶和抗菌肽。

进一步的，按质量百分比计，所述复合微针的组分为：硫化铜纳米酶0.5％～1.5％，抗菌肽8％～12％，透明质酸钠70％～80％，羧甲基纤维素钠10％～20％，余量为溶剂。

进一步的，所述抗菌肽为PAF26抗菌肽。

进一步的，所述透明质酸钠的分子量为20kDa-80kDa，所述羧甲基纤维素钠的粘度为800mPa·s～1200mPa·s。

进一步的，所述复合微针的密度为300根/cm²-400根/cm²，针尖高度为400μm-800μm，针尖距离为300μm-400μm。

进一步的，所述复合微针的背衬层为透明质酸钠。

进一步的，所述复合微针具有良好的机械性能、溶解性以及生物相容性。