[发明专利]一种多花黄精组织培养方法

权利要求书

1.一种多花黄精组织培养方法，其特征在于，所述方法为以多花黄精未成熟种子经冷藏和机械损伤处理后得到的种子作为外植体进行组织培养；

所述未成熟种子从花凋谢后50-70天采摘的多花黄精未成熟果实中收集；

所述机械损伤处理具体为在种脐往上1mm处切除切包含种脐在内的部分组织；

所述冷藏为4℃冷藏5天；

所述方法还包括如下步骤：将外植体接种到初代培养基上培养得到带芽小球茎；将所述带芽小球茎接种到继代培养基上培养至获得大量带不定芽的愈伤组织；将继代获得的不定芽接种到不定芽增殖培养基上；不定芽增殖培养基培养得到的不定芽，高度3.0cm以上的直接作为多花黄精无根苗用于生根，高度小于3.0cm的接种到壮苗培养基上进行壮苗得到高度3.0cm以上的多花黄精无根苗；

所述初代培养基为向MS基本培养基中添加6-BA、2,4-D、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述初代培养基中6-BA的含量为2.0-3.0mg/L、2,4-D的含量为1.0-1.5mg/L；

所述继代培养基为向MS基本培养基中添加6-BA、NAA、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述继代培养基中6-BA的含量为2.0mg/L、NAA的含量为0.1mg/L；

所述不定芽增殖培养基为向MS基本培养基中添加6-BA、TDZ、NAA、2,4-D、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述不定芽增殖培养基中6-BA的含量为1.5mg/L、TDZ的含量为0.5mg/L、NAA的含量为0.5mg/L、2,4-D的含量为0.5mg/L；

所述壮苗培养基为向MS基本培养基中添加6-BA、2,4-D、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述壮苗培养基中6-BA的含量为3.0mg/L、2,4-D的含量为0.15mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述初代培养基激素的组成为6-BA的含量为2.0mg/L、2,4-D的含量为1.0mg/L，或6-BA的含量为3.0mg/L、2,4-D的含量为1.5mg/L。

3.根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将多花黄精无根苗接种到生根培养基上进行生根培养得到多花黄精生根苗的步骤，所述生根培养基为向1/2MS基本培养基中添加IBA、蔗糖和凝固剂得到的固体培养基，所述生根培养基中IBA的含量为1.0mg/L。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，获取所述外植体包括消毒的步骤。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将所述多花黄精生根苗炼苗后移栽定植。