[发明专利]胶体金免疫层析试纸的制备方法、胶体金免疫层析试纸及试纸盒

说明书

本发明涉及免疫检测分析技术领域，特别涉及一种胶体金免疫层析试纸的制备方法、胶体金免疫层析试纸及试纸盒。胶体金免疫层析试纸的制备方法，包括以下步骤：将流感病毒A抗体与粒径为50nm‑70nm的胶体金颗粒结合形成免疫标签，将免疫标签固定于结合垫，备用；在层析膜上设置检测线和质控线，将用以识别流感病毒A抗原的第一抗体固定在检测线，将用以识别流感病毒A抗体的第二抗体固定在质控线，备用；将样本垫、固定有免疫标签的结合垫、固定有第一抗体和第二抗体的层析膜以及吸水垫依次设置在底板上，形成检测流感病毒A抗原的胶体金免疫层析试纸。

技术领域

本发明涉及免疫检测分析技术领域，特别涉及一种胶体金免疫层析试纸的制备方法、胶体金免疫层析试纸及试纸盒。

背景技术

胶体金免疫层析技术是一种将抗原抗体免疫反应与胶体金标记示踪技术结合用于抗原、抗体含量定性定量检测的技术。抗体的胶体金标记主要是通过胶体金与蛋白质之间的静电作用力进行牢固结合的，由于其快速、简便、成本低、稳定性好等优点，特别是为现场快速检测叩开了一扇崭新的大门。

流行性感冒病毒简称流感病毒。它分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，流感病毒可引起人、禽、猪、马、蝙蝠等多种动物感染和发病，是人流感、禽流感、猪流感、马流感等人与动物疫病的病原。其中人类流感病毒根据其核蛋白的抗原性可以分为三类:甲型流感病毒(Influenza Avirus)，又称A型流感病毒；乙型流感病毒(Influenza B virus)，又称B型流感病毒；丙型流感病毒(Influenza C virus)，又称C型流感病毒，甲型流感病毒(InfluenzaA virus)为常见流感病毒，甲型流感病毒最容易发生变异。

现有技术中，有采用胶体金免疫层析技术检测流感病毒A，在制备免疫标签的过程中，需要使用纳米金溶液与抗体进行反应，以在纳米金表面标记上抗体，在标记过程中会出现标记效率低的问题，如何提高标记效率是需要解决的问题。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种胶体金免疫层析试纸的制备方法，旨在提高标记效率。

为实现上述目的，本发明提出的一种胶体金免疫层析试纸的制备方法，包括以下步骤：

将流感病毒A抗体与粒径为50nm-70nm的胶体金颗粒结合形成免疫标签，将所述免疫标签固定于结合垫，备用；

在层析膜上设置检测线和质控线，将用以识别流感病毒A抗原的第一抗体固定在所述检测线，将用以识别所述流感病毒A抗体的第二抗体固定在所述质控线，备用；

将样本垫、固定有所述免疫标签的结合垫、固定有所述第一抗体和所述第二抗体的层析膜以及吸水垫依次设置在底板上，形成检测流感病毒A抗原的胶体金免疫层析试纸。

可选地，在将流感病毒A抗体与粒径为50nm-70nm的胶体金颗粒结合形成免疫标签，将所述免疫标签固定于结合垫，备用的步骤中，包括以下步骤：

准备质量体积浓度为万分之四、粒径为50nm-70nm的胶体金颗粒构成的胶体金溶液，并调节所述胶体金溶液的pH，然后加入浓度为10ug/mL-30ug/mL流感病毒A抗体，反应预设时间，再加入封闭剂，封闭预设时间，得到反应后的溶液并浓缩，得到免疫标签，采用复溶液将所述免疫标签重悬，得到免疫标签复溶液，将所述免疫标签复溶液涂覆于结合垫，烘干，备用。

可选地，在将流感病毒A抗体与粒径为50nm-70nm的胶体金颗粒结合形成免疫标签，将所述免疫标签固定于结合垫，备用的步骤中，包括以下步骤：