[发明专利]一种特异性结合E2-E2抗体复合物的抗体及其应用

说明书

本申请提供了特异性结合E2‑E2抗体复合物的抗体及其应用。本申请提供的抗E2‑E2抗体复合物的抗体能够与E2‑E2抗体特异性结合，具有较好的结合活性和亲和力。通过使用本申请中的抗体进行夹心法检测E2，大大提高了E2检测的灵敏度和抗干扰能力，并且提高了低值样本的检出率。

技术领域

本发明涉及生物技术和医学技术领域，尤其是涉及一种抗雌二醇(E2)-雌二醇抗体复合物的抗体及其应用。

背景技术

雌二醇(Estradiol，E2)是固醇类激素，其基本骨架为甾体结构，即环戊烷多氢菲，由三个环己烷和一个环戊烷稠合而成。雌二醇是雌激素中最主要且生物活性最强的激素，其对哺乳动物的生殖系统、免疫反应和基因表达等方面起着重要作用。在血液中E2在男女的各种临床状况中均是重要的诊断标志物。

临床上，E2水平用于评估女性的月经失调，性早熟或青春期延迟以及卵巢功能，多毛症、多囊卵巢综合症，同时在妊娠相关疾病监测中，监测整个妊娠期间的E2水平，联合孕酮和抑制素B水平，预测妊娠患者葡萄胎的风险。男性E2的检测可用于男性乳房发育评估，青春期延迟或不育等。

目前临床上检测E2的主流方法学为免疫分析法，由于E2属于激素类小分子化合物，抗原决定簇单一，无法支持两个不同的抗体进行夹心检测，因此临床免疫测定一般采用竞争法。

然而，竞争法检测小分子抗原存在灵敏度和抗干扰能力差的问题，尤其是对低值样本检出能力较差。因此亟需解决现有竞争法检测E₂的灵敏度低、抗干扰能力差的问题，并提高低值样本的检出率。

目前较为可行复合物抗体夹心法，具体的检测原理为，一株抗E2抗体(第一抗体)与待测抗原形成免疫复合物，另一株抗复合物抗体(第二株抗体)与前述免疫复合物结合形成免疫夹心复合物，识别位点为第一株抗体和小分子半抗原结合后形成的新表位，且要求复合物抗体与游离的第一株抗体和小分子半抗原均无结合。通过复合物抗体夹心法的运用，可以极大提高小分子抗原检测的灵敏度和准确度。然而筛选复合物抗体的难度较大，适用于夹心法的高亲和力复合物抗体目前暂未有报道。

发明内容

以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。

本申请提供了一种抗雌二醇(E2)-雌二醇抗体复合物的抗体及其应用。本申请提供的抗雌二醇(E2)-雌二醇抗体复合物的抗体能够与E2抗原特异性结合，具有较好的结合活性和亲和力。通过使用本申请中的抗体进行夹心法检测E2，大大提高了夹心法检测的检测灵敏度和抗干扰能力，并且提高了低值样本的检出率。

在一个方面中，本申请提供了一种特异性结合E2-E2抗体复合物的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括以下互补决定区：

互补决定区CDR1-VH，其氨基酸序列为SYGVH(SEQ ID NO:1)；

互补决定区CDR2-VH，其氨基酸序列为VIWX₁GGSTNYNSALMS(SEQ ID NO:19)，其中X₁是A或G；

互补决定区CDR3-VH，其氨基酸序列为X₂EGX₃AX₄AMDY(SEQ ID NO:20)，其中X₂是D或G，X₃是Y、S或T，X₄是G或Y；

互补决定区CDR1-VL，其氨基酸序列为RASESVDNFGISFMN(SEQ ID NO:8)；

互补决定区CDR2-VL，其氨基酸序列为X₅ASNQGS(SEQ ID NO:21)，其中X₅是A或T；