[发明专利]一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选

权利要求书

1.一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，其特征在于，包括如下步骤：

S1、脂质体制备：

S101、称取处方量的胆固醇、磷脂、索拉菲尼，置于球形瓶中，加入氯仿溶解；

S102、将球形瓶置于旋转蒸发仪上旋转蒸发氯仿，膜材料形成薄膜，将球形瓶放在真空干燥箱中减压干燥；

S103、取出球形瓶加入硫酸铵，恒温摇床37℃，200rpm水化1h，用细胞探头超声仪超声，然后进行透析，透析袋截留量为8000～14000，第二天取出透析袋，倒入烧杯中，加入适量的阿霉素，在一定温度下进行载药，完成后取出，透析；

S104、取出1mL实验样品X和1mL未透析的样品X₀，加到5mL容量瓶中，加入1％的曲拉通定容，破乳30min，用荧光分光光度计测量阿霉素浓度，高效液相测量索拉菲尼浓度，按照公式：包封率＝X/X₀，分别计算阿霉素及索拉菲尼的包封率；

S2、硫酸铵浓度的筛选：

设置硫酸铵浓度分别为0.1moL/L，0.2moL/L，0.3moL/L，0.4moL/L，按照步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S3、胆固醇磷脂比的筛选：

设置胆固醇磷脂比分别为1:1，1:2，1:4，1:6，1:8，按步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S4、脂质浓度的筛选：

设置脂质浓度分别为2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL，10mg/mL，按步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S5、药脂比的筛选：

设置药脂比分别为1:10，1:20，1:30，1:40，制备脂质体，按步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S6、载药时间的筛选：

设置载药时间分别为10，15，20，25，30min，按步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S7、载药温度的筛选：

设置载药温度分别为45，50，55，60，65℃，按步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率。

2.根据权利要求1所述一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，其特征在于，还包括阿霉素标准曲线的建立，具体为：

精密称取适量盐酸阿霉素，加水配制成20ug/mL，15ug/mL，10ug/mL，5ug/mL，2.5ug/mL，1.3ug/mL，以激发波长Ex为470nm，发射波长Em为590nm，用荧光分光光度仪测定荧光强度，将浓度与荧光强度进行线性回归，线性回归方程为y＝42.368x-16.349，R²＝0.9994。

3.根据权利要求1所述一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，其特征在于，还包括索拉菲尼标准曲线的建立，具体为：

精密称取适量索拉菲尼，用甲醇溶解配置成40ug/mL，20ug/mL，10ug/mL，5ug/mL，2.5ug/mL，1.3ug/mL，0.7ug/mL，取20uL进样并计算峰面积，将浓度与峰面积进行线性回归，线性回归方程为y＝74.352x+22.548，R²＝0.9991。

4.根据权利要求1或3所述一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，其特征在于，高效液相测量索拉菲尼浓度时，流动相：乙腈:水＝63:37，流速1mL/min，柱温为37℃，进样量为20uL。