[发明专利]一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选

说明书

本发明公开了一种一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，属于生物医药技术领域，包括如下步骤：S1、脂质体制备；S2、硫酸铵浓度的筛选；S3、胆固醇磷脂比的筛选；S4、脂质浓度的筛选；S5、药脂比的筛选；S6、载药时间的筛选；S7、载药温度的筛选。本发明将阿霉素及索拉菲尼装载在脂质体中，并用甘草次酸及细胞穿透肽(TAT)对脂质体进行修饰，甘草次酸能够特异性靶向肝癌细胞，TAT能够提高脂质体进入肝癌细胞的效率，从而实现靶向肝癌细胞的目的。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选。

背景技术

肝癌是目前主要导致人类死亡的几大癌症之一，在癌症相关死亡中排名第三。慢性酒精摄入、病毒性乙型和丙型肝炎感染、代谢性疾病和年龄等多种因素触发肝癌的发生和发展。早期肝癌常见症状并无特异性，中晚期肝癌的症状则较多，常见的临床表现有肝区疼痛、腹胀、纳差、乏力、消瘦、进行性肝大或上腹部包块等；部分患者有低热、黄疸、腹泻、上消化道出血；肝癌破裂后出现急腹症表现等。目前治疗肝癌的方法主要有手术治疗、化学药物治疗、放射治疗、生物治疗、中医中药治疗等，但是，全球HCC患者5年生存率仍然低于5％。其中主要治疗方法是手术切除，切除后，如果肿瘤大小小于2cm，病人存活率可达到70％。其次，最常用的治疗方法是药物治疗，阿霉素是常用的治疗癌症的药物，对多种癌症都有治疗效果，可抑制RNA和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强，属于周期非特异性药物，具有强烈的细胞毒性作用，然而，这也导致了阿霉素靶向性差，不良反应多，全身不良反应多等缺点。索拉非尼具有双重抗肿瘤作用：既可通过阻断RAF/MEK/EPK介导的细胞信号通路而直接抑制肿瘤细胞的增殖，还可通过抑制VEGFR和血小板衍生生长受体而阻断肿瘤新生血管的形成，间接地抑制肿瘤细胞的生长。晚期肝癌可加重肝功能障碍，使全身给药无效，此外，耐药性的发展和全身副作用也阻碍了药物治疗方案的发展。

阿霉素和索拉菲尼是临床上治疗治疗肝癌的一线药物，两种药物具有协同作用，但直接用药时容易产生全身作用，不能准确的靶向肝癌细胞。直接使用阿霉素及索拉菲尼不能准确靶向于肝癌细胞，生物安全性较低，治疗效率较差，具有多种毒副作用。

发明内容

本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种双配体修饰的载阿霉素及索拉菲尼脂质体的处方筛选，包括如下步骤：

S1、脂质体制备：

S101、称取处方量的胆固醇、磷脂、索拉菲尼，置于球形瓶中，加入氯仿溶解；

S102、将球形瓶置于旋转蒸发仪上旋转蒸发氯仿，膜材料形成薄膜，将球形瓶放在真空干燥箱中减压干燥；

S103、取出球形瓶加入硫酸铵，恒温摇床37℃，200rpm水化1h，用细胞探头超声仪超声，然后进行透析，透析袋截留量为8000～14000，第二天取出透析袋，倒入烧杯中，加入适量的阿霉素，在一定温度下进行载药，完成后取出，透析；

S104、取出1mL实验样品X和1mL未透析的样品X₀，加到5mL容量瓶中，加入1％的曲拉通定容，破乳30min，用荧光分光光度计测量阿霉素浓度，高效液相测量索拉菲尼浓度，按照公式：包封率＝X/X₀，分别计算阿霉素及索拉菲尼的包封率；

S2、硫酸铵浓度的筛选：

设置硫酸铵浓度分别为0.1moL/L，0.2moL/L，0.3moL/L，0.4moL/L，按照步骤S1的方法制备脂质体，按照公式计算阿霉素及索拉菲尼包封率；

S3、胆固醇磷脂比的筛选：