[发明专利]一种催化合成L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷的环糊精转移酶的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 202211723747.0 | 申请日： | 2022-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN115976157A | 公开（公告）日： | 2023-04-18 |
| 发明（设计）人： | 曾庆宇;程磊雨;温俊婷;刘辉;陈剑波;姚浩楠;楼一缇 | 申请（专利权）人： | 黑龙江新和成生物科技有限公司;上虞新和成生物化工有限公司;浙江新和成股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;C12Q1/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州宇信联合知识产权代理有限公司 33401 | 代理人： | 梁群兰 |
| 地址： | 152000 黑龙江省*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 催化 合成 抗坏血酸 葡萄 糖苷 环糊精 转移酶 通量 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种催化合成L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷的环糊精转移酶的高通量筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：
在待筛选菌株的培养体系中加入β-环糊精和抗坏血酸，调节pH至5.0-6.0进行催化反应；
催化反应之后去除菌株，加入氧化剂进行氧化反应；
氧化反应之后加入L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷的显色剂进行显色。
2.根据权利要求1所述的筛选方法，所述β-环糊精和抗坏血酸的添加重量比为1：1-2。
3.根据权利要求1所述的筛选方法，所述氧化剂为过氧化氢、臭氧、Fe3+盐和空气或氧气的组合中的一种或者多种的组合。
4.根据权利要求1所述的筛选方法，所述氧化剂为过氧化氢。
5.根据权利要求1所述的筛选方法，所述显色剂为磷钼酸，加热到70-90℃进行显色。
6.根据权利要求1所述的筛选方法，所述显色反应之后通过酶标仪检测吸光度，通过吸光度数据定量确定L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷的含量。
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