[发明专利]一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将奥沙利铂溶于水中，再加入H₂O₂溶液，35-45℃避光反应20-30h，经双氧水氧化得到化合物OXA-OH(IV)；

S2、将OXA-OH(IV)和丁二酸酐同时溶于有机溶剂中，反应至溶液呈澄清状态，经丁二酸酐氧化得到OXA-COOH(IV)化合物；

S3、将EDC、NHS和OXA-COOH(IV)同时溶于盐酸溶液中，反应10-20min后再加入DA，并调节pH至7.0-7.5，继续反应2-30h后干燥收集样品即得OXA-DA(IV)化合物；

S4、将F127和TMB溶液加入到有机溶剂中，反应25-35min后再加入DA、OXA-DA和Tris缓冲液，室温反应8-12h，制得OXA-DA纳米粒；

S5、将OXA-DA NPs和盐酸胍溶液分散于有机溶剂中，再加入siPD-L1，经离心处理后即得OXA-DA-siPD-L1 NPs；

S6、将OXA-DA-siPD-L1 NPs分散于Tris缓冲液中，再加入多巴胺，避光反应2-3h后即得OXA-DA-siPD-L1@PDA NPs；

S7、将OXA-DA-siPD-L1@PDANP和PEOz-NH₂分散于Tris缓冲液中，室温反应10-15h后得到OXA-DA-siPD-L1@PDA-PEOz NPs。

2.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S1中，奥沙利铂在水中的浓度为0.3-1g/100mL，奥沙利铂水溶液与H₂O₂溶液的体积比为100:1-3。

3.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S2中，OXA-OH(IV)与丁二酸酐的质量比为3-5:1，OXA-OH(IV)在有机溶剂中的浓度为0.5-5mM。

4.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S3中，EDC、NHS、OXA-COOH(IV)与DA的质量比为(70-130):(100-200):(70-130):(70-130)，OXA-COOH(IV)在盐酸溶液中的浓度为90-110mg/100mL。

5.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S4中，F127、DA、OXA-DA和Tris缓冲液的质量比为(0.3-0.4):(50-60):(5-7):(80-10)，F127在有机溶剂中的浓度为0.3-0.4g/120mL，TMB溶液与有机溶剂的体积比为0.4-0.6:120。

6.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S5中，OXA-DA NPs在有机溶剂中的浓度为1-3mg/267μL，盐酸胍溶液的浓度为38.4％，盐酸胍溶液与有机溶剂的体积比为60-70:267，siPD-L1使用前先用DEPC水处理成5nM的浓度，siPD-L1溶液与盐酸胍溶液的体积比为1:1。

7.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S6中，OXA-DA-siPD-L1 NPs在Tris缓冲液中的浓度为2mg/mL，OXA-DA-siPD-L1 NPs与多巴胺的比例为4:3。

8.根据权利要求1所述的一种pH响应电荷翻转的纳米复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤S7中，OXA-DA-siPD-L1@PDA NP在Tris缓冲液中的浓度为0.5mg/mL，OXA-DA-siPD-L1@PDA NP与PEOz-NH2的比例为5:1。

9.采用权利要求1-8任一项所述的制备方法制备得到的pH响应电荷翻转的纳米复合制剂。

10.权利要求9所述的pH响应电荷翻转的纳米复合制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。