[发明专利]利用液相色谱-串联质谱同时定量分析利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相色谱-串联质谱联用装置同时定量分析利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)制备含有利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班的样品溶液；

2)将所述样品溶液注入到高效液相色谱-串联质谱联用装置中，获得质量色谱图；

3)根据所述质量色谱图使用内标法对利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班进行定量分析，

其中，所述高效液相色谱中使用由流动相A和流动相B组成的混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为含0.05体积％至0.25体积％甲酸和1mmol/L至10mmol/L甲酸铵的水溶液，所述流动相B为含0.05体积％至0.30体积％甲酸的乙腈-甲醇溶液，其中所述流动相B中的乙腈与甲醇的体积比为2：1至5：1。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述流动相A含有0.10体积％至0.20体积％的甲酸和4mmol/L至8mmol/L的甲酸铵，并且所述流动相B含有0.10体积％至0.20体积％的甲酸。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述梯度洗脱程序的总时长不超过15分钟，并且在所述梯度洗脱程序中，起始流动相和最终流动相均为75体积％流动相A+25体积％流动相B，流动相B的浓度梯度从25体积％变化至60体积％所用的时间为0.5至1.5min。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述梯度洗脱程序为：

0.00至5.00min，25体积％至60体积％流动相B；

5.00至5.60min，60体积％至80体积％流动相B；

5.60至7.00min，80体积％至25体积％流动相B，

其中流动相A和流动相B的总量为100体积％。

5.根据权利要求3所述的方法，其中所述梯度洗脱程序为：

0.00至4.00min，25体积％至25体积％流动相B；

4.00至5.00min，25体积％至60体积％流动相B；

5.00至5.50min，60体积％至60体积％流动相B；

5.50至5.60min，60体积％至80体积％流动相B；

5.60至6.00min，80体积％至80体积％流动相B；

6.00至6.01min，80体积％至25体积％流动相B；

6.01至7.00min，25体积％至25体积％流动相B，

其中流动相A和流动相B的总量为100体积％。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述高效液相色谱中的色谱柱为反相色谱柱，优选以十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班来自受试者的血浆或尿液。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述制备含有利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班的样品溶液包括：向受试者的血浆中加入内标工作液，然后加入沉淀剂乙腈，涡旋混合后将所得混合物离心，取上清液用所述流动相B稀释并且混匀。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述制备含有利伐沙班、阿哌沙班、艾多沙班和贝曲沙班的样品溶液包括：向受试者的尿液中加入内标工作液，然后用体积比为1：3的乙腈-水混合物稀释。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述利伐沙班的去簇电压DP为50至200V，并且所述利伐沙班的碰撞能量CE为20至40V；

所述阿哌沙班的去簇电压DP为50至200V，并且所述阿哌沙班的碰撞能量CE为15至55V；

所述艾多沙班的去簇电压DP为50至200V，并且所述艾多沙班的碰撞能量CE为15至55V；

所述贝曲沙班的去簇电压DP为50至200V，并且所述贝曲沙班的碰撞能量CE为15至55V。