[发明专利]一种亲和试剂及其分离方法、检测蛋白质中水杨酰化赖氨酸的方法在审
申请号: | 202211649216.1 | 申请日: | 2022-12-21 |
公开(公告)号: | CN116284347A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 戴伦治;龚艳秋 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C07K16/06 | 分类号: | C07K16/06;G01N33/68 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 覃蛟 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 亲和 试剂 及其 分离 方法 检测 蛋白质 水杨 赖氨酸 | ||
1.一种分离的亲和试剂,其特征在于,所述亲和试剂特异性地结合肽中的水杨酰化赖氨酸。
2.根据权利要求1所述的分离的亲和试剂,其特征在于,所述肽为具有赖氨酸水杨酰化位点的氨基酸组合或蛋白质;
优选地,所述氨基酸组合或蛋白质来源于真核生物;
优选地,所述氨基酸组合或蛋白质来源于脊椎动物、无脊椎动物或酵母;
优选地,所述脊椎动物为鱼类、爬行类、鸟类、两栖类或哺乳类动物;所述无脊椎动物为原生动物、腔肠动物、腐性动物、线性动物、环节动物、软体动物、节肢动物、蠕虫、棘皮动物或甲壳动物;
优选地,所述脊椎动物选自人、绵羊、牛、马、驴、山羊、鹿、家禽、猪、猫、狗、猴、小鼠或大鼠;
所述无脊椎动物选自秀丽隐杆线虫、果蝇或四膜虫。
3.根据权利要求1或2所述的分离的亲和试剂,其特征在于,所述肽选自:与SEQ ID NO:1-251任一项所示的氨基酸序列具有至少70%同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1或2所述的分离的亲和试剂,其特征在于,所述肽在所述水杨酰化赖氨酸的N端和C端侧上均包含至少1个氨基酸残基。
5.根据权利要求1或2所述的分离的亲和试剂,其特征在于,所述亲和试剂为蛋白质;
优选地,所述亲和试剂为抗体。
6.一种检测蛋白质或其片段中的水杨酰化赖氨酸的方法,其特征在于,其包括如下步骤:
将所述蛋白质或其片段与权利要求1-5任一项所述的分离的亲和试剂接触,其中所述亲和试剂特异性地结合到肽中的水杨酰化赖氨酸中,由此形成所述蛋白质或其片段与所述亲和试剂的结合复合物;检测所述结合复合物。
7.一种如权利要求1-5任一项所述的分离的亲和试剂的分离方法,其特征在于,其包括如下步骤:
将蛋白库暴露于包含水杨酰化赖氨酸的多肽中,由此来自于蛋白库的样本可特异性结合到水杨酰化赖氨酸中并与多肽形成结合复合物;从所述结合复合物中分离出蛋白质即为亲和试剂。
8.一种如权利要求1-5任一项所述的分离的亲和试剂的分离方法,其特征在于,其包括如下步骤:
用包含水杨酰化赖氨酸的肽免疫宿主,获得抗体。
9.一种试剂或试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1-5任一项所述的分离的亲和试剂、权利要求7所述的分离方法分离获得的亲和试剂或权利要求8所述的分离方法获得的亲和试剂。
10.一种如权利要求1-5任一项所述的分离的亲和试剂在制备试剂盒中的应用。
11.一种复合物,其特征在于,其包括:亲和试剂、以及与所述亲和试剂特异性结合的肽;所述亲和试剂特异性地结合肽中的水杨酰化赖氨酸;
优选地,所述肽选自:与SEQ ID NO:1-251任一项所示的氨基酸序列具有至少70%同一性的氨基酸序列;
优选地,所述亲和试剂为蛋白质;
优选地,所述亲和试剂为抗体。
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