[发明专利]一种融合囊泡，其制备方法、纳米药物递送系统和应用

说明书

本发明提供了一种融合囊泡，其制备方法、纳米药物递送系统和应用。所述融合囊泡包括T细胞膜囊泡和负载有光热剂的热敏脂质体。本发明可以在保留光热治疗优势的基础上对其诱导的免疫抑制进行有效减少，极大的增强了基于光热治疗的免疫响应，为解决光热治疗所面临的临床困境提供了新的思路。本发明首次使用T细胞膜囊泡与经典药物递送载体脂质体光热剂制备一体化融合囊泡，可以有效到达肿瘤部位发挥作用，具有良好的生物安全性和临床个性化治疗潜力。

技术领域

本发明属于纳米药物领域，具体涉及一种融合囊泡，其制备方法、纳米药物递送系统和应用。

背景技术

光热疗法(Photothermal therapy,PTT)近些年被广泛应用于肿瘤的治疗，它使用光热剂在近红外(Near infrared，NIR)光照射下通过光热转换产生足够的热量杀死肿瘤细胞，具有高选择性和微创性的优点。此外，还发现光热治疗可以通过诱导肿瘤细胞的细胞免疫原性死亡(Immunogenic cell death，ICD)并触发肿瘤相关抗原和损伤相关分子模式(Damage associated molecular patterns，DAMPs)的释放，有效激活抗肿瘤免疫。然而，由光热治疗单独引起的免疫响应十分有限，这应该归因于某些关键免疫抑制途径的上调，例如程序性细胞死亡蛋白配体1(Programmed cell death protein ligand 1，PD-L1)。由于光热治疗会导致细胞因子IFN-γ的释放增加，从而激活JAK/STAT通路，促进PD-L1的关键转录因子IRF的上调，最终作用于PD-L1蛋白的表达上调。上调的PD-L1蛋白将与T淋巴细胞表面的PD-1蛋白结合，导致肿瘤细胞的免疫检测逃避能力增强，从而抑制毒性T淋巴细胞的功能。PTT诱导的对免疫检查点阻断的抗性是目前基于PTT的肿瘤免疫治疗的主要困难。因此，阻断上调的PD-L1通路是增强PTT免疫应答的有效策略。

受来自肿瘤细胞的细胞外囊泡表面上的PD-L1蛋白也可以通过与T淋巴细胞表面上高度表达的PD-1蛋白结合，以实现免疫逃逸而抑制T淋巴细胞的免疫应答的启发。发明人假设表面高表达PD-1蛋白的T淋巴细胞衍生的膜囊泡也可以用于阻断肿瘤细胞表面上调的PD-L1，来减少PTT导致的免疫抑制。但是由于膜囊泡对于光热剂ICG有限的包载率，会降低光热治疗的效率，提高了膜囊泡制备的不必要成本增加。目前尚未有研究将T细胞膜囊泡与负载有光热剂的热敏脂质体融合用于强化光热免疫治疗。

发明内容

因此，本发明的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一种融合囊泡，其制备方法、纳米药物递送系统和应用。本发明首次借助于热敏脂质体对于ICG的高效负载，通过膜融合的方法制备融合纳米囊泡，来实现对于肿瘤的增强的光热免疫结合治疗。本发明可以在实现肿瘤有效光热治疗的同时，阻断肿瘤细胞表面上调的PD-L1与T淋巴细胞表面PD-1的结合，减少肿瘤细胞的免疫逃避，扭转T淋巴细胞的免疫耗竭，克服光热治疗伴随的低免疫响应率，增强光热治疗的治疗效果，为光热治疗提供新思路，具有巨大的临床价值。

在阐述本发明之前，定义本文所使用的术语如下：

术语“TMV”是指T细胞膜囊泡。

术语“TMVL”是指T细胞膜囊泡-热敏脂质体的融合囊泡。

术语“L-I”是指负载有光敏剂ICG的热敏脂质体。

术语“TMVL-I”是指T细胞膜囊泡-负载光敏剂ICG的热敏脂质体的融合囊泡。

术语“L-I+Laser”是指负载有光敏剂ICG的热敏脂质体与近红外激光照射治疗。

术语“TMVL-I+Laser”是指T细胞膜囊泡-负载光敏剂ICG的热敏脂质体的融合囊泡与近红外激光照射治疗。