[发明专利]一种快速培育剑叶芦竹种苗的组培方法

说明书

本发明属于剑叶芦竹繁殖技术领域，公开了一种快速培育剑叶芦竹种苗的组培方法，包括以下步骤：1）将消毒冲洗后的茎段切成1.5~2.5cm长的带腋芽茎段作为外植体；2）将外植体接种至诱导培养基上，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行芽丛诱导培养，获得丛生芽；3）将单个丛生芽接种至继代培养基上，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行继代培养，获得无根苗；4）将无根苗转接至生根培养基上，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行无根苗的生根培养；5）移栽：将5cm的生根苗炼苗一周，清洗，消毒，移栽。本发明提供组培方法，可培育得到的剑叶芦竹种苗无菌健壮、质量高、移栽后成活率高，有利于剑叶芦竹种苗的工厂化生产。

技术领域

本发明属于剑叶芦竹繁殖技术领域，涉及一种快速培育剑叶芦竹种苗的组培方法。

背景技术

剑叶芦竹，商用名：肥肥草，是芦竹的一种，属于禾本科芦竹属，剑叶芦竹亚型，为多年生草本植物，具发达根状茎，茎秆粗大，生物量大。剑叶芦竹适应性强，具有蛋白质含量高，可以用于家畜家禽的饲料；耐盐碱、耐贫瘠、耐干旱、耐涝等特点，在防治土壤退化和生态治理修复上有较大潜力。此外，剑叶芦竹还可以用于生产纸张、板材及生物质能源，利用途径多样，发展前景广阔。随着剑叶芦竹功能的逐渐开发，其种苗需求量越来越大。如何快速繁殖大量种苗成为其应用推广的关键问题。

由于剑叶芦竹不能靠种子繁育，只能通过无性繁殖进行繁育。常规的方法是分蘖埋根或茎秆分节扦插，但这种方法存在繁殖系数低、增殖速度慢、种苗质量差、种植后分蘖少等问题，难以满足剑叶芦竹生产发展的需要。

植物组织培养技术具有繁殖系数高、繁殖速度快、种苗质量高、可以规模化工厂生产等优点，可以培育大量整齐一致的优质无病种苗，能够有效地解决剑叶芦竹优质种苗供应紧张的问题，满足社会对剑叶芦竹生产发展的需求。

发明内容

本发明针对现有技术中剑叶芦竹繁殖速度慢、种苗质量不齐的技术问题，提供一种快速培育剑叶芦竹种苗的组培方法，培育得到的剑叶芦竹（肥肥草）种苗无菌健壮、质量高、移栽后成活率高，有利于剑叶芦竹（肥肥草）种苗的工厂化生产。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种快速培育剑叶芦竹种苗的组培方法，包括以下步骤：

1）外植体消毒：取幼嫩的剑叶芦竹茎秆，去掉叶片及叶鞘，截成小段，先用洗洁精稀释液浸泡15min，再用流水冲洗3h，再在超净工作台中将茎段用75%乙醇浸泡30s、5%次氯酸钠消毒6min，无菌水冲洗5次，每次冲洗2~3min；将消毒冲洗后的茎段切成1.5~2.5cm长的带腋芽茎段作为外植体，带腋芽茎段的节下长0.5~1.0cm、节上长1.0~1.5cm；

2）初代培养：将外植体接种至诱导培养基上，诱导培养基组分如下：MS+3~5mg/L6-BA+0.9~1.1mg/L IBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行芽丛诱导培养，获得丛生芽；

3）继代培养：将步骤2获得的单个丛生芽接种至继代培养基上，继代培养基组分如下：MS+5~7mg/L6-BA+0.9~1.1mg/L IBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂上，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行继代培养，获得无根苗；一个丛生芽继代4次，继代培养的光照培养箱的培养条件和步骤2）初代培养的光照培养箱的培养条件相同；

4）生根培养：将步骤3）获得的无根苗转接至生根培养基上，生根培养基组分如下：1/2MS+0.1~0.3mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂上，之后将培养瓶置于光照培养箱中进行无根苗的生根培养；生根培养的光照培养箱的培养条件和步骤2）初代培养的光照培养箱的培养条件相同；

5）移栽：将5cm的生根苗炼苗一周，清洗，消毒，移栽。

在一个技术方案中，所述带腋芽茎段的节下呈斜切面，节上呈平切面。

在一个技术方案中，步骤2）中培养条件为：温度25℃，光照时间为9~11h，光照强度为18000~20000lux，湿度为60%。