[发明专利]一种小米醇溶蛋白活性肽、功能肽及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202211638419.0 | 申请日: | 2022-12-19 |
| 公开(公告)号: | CN116083511A | 公开(公告)日: | 2023-05-09 |
| 发明(设计)人: | 沈群;朱益清;付永霞;赵卿宇;陈昶宇;薛勇 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K7/06;C07K1/14;C07K1/20;A61K38/01;A61K38/08;A61P3/10;A23L33/18 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 薛红凡 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 小米 蛋白 活性 功能 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,包括以下步骤制备得到:
将脱脂的小米经体积百分含量的60%~80%的乙醇水溶液提取,得到小米醇溶蛋白;
将所述小米醇溶蛋白经破碎进行蛋白酶酶解,收集酶解液为小米醇溶蛋白活性肽。
2.根据权利要求1所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述脱脂的小米和乙醇水溶液的质量比为1:5~10。
3.根据权利要求1所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述提取的温度为48~52℃;
所述提取的时间为1~3h。
4.根据权利要求1或3所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述提取后,还包括对提取液进行纯化;
所述纯化的方法为透析,收集透析袋中的溶液;
所述透析用透析袋的截留分子量为6000~8000Da。
5.根据权利要求1所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述蛋白酶包括以下至少一种酶:碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶。
6.根据权利要求1或5所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述酶解时体系的pH值为2~8;
所述酶解的温度为30~60℃;
所述酶解的时间为1~5h;
所述酶解时蛋白酶的添加质量占小米质量的1%~3%。
7.根据权利要求1所述小米醇溶蛋白活性肽,其特征在于,所述破碎的方法为超声波破碎;
所述超声波破碎时,超声波的功率为100~500W,超声波破碎的时间为5~25min。
8.一种从权利要求1~7任意一项所述小米醇溶蛋白活性肽中分离的功能肽,其特征在于,所述功能肽为氨基酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:3所示的多肽中的一种或几种。
9.一种权利要求8所述功能肽的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
将权利要求1~7任意一项所述小米醇溶蛋白活性肽溶解进行滤膜过滤,收集滤过液经反相高效液相色谱纯化,收集对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性较高的馏分为功能肽;
所述反相高效液相色谱纯化的条件为:
采用C18色谱柱,洗脱液为流动相A和/或流动相B;所述流动相A为含体积百分含量的0.1%甲酸水溶液,所述流动相B为含体积百分含量0.1%甲酸乙腈水溶液,流速为250nL/min;
液相梯度程序如下:0~50min,体积百分含量4%~50%的流动相B;
50~54min,体积百分含量50%~100%的流动相B;
54~60min,体积百分含量100%的流动相B;
液相色谱柱以体积百分含量95%的流动相A进行平衡。
10.权利要求1~7任意一项所述小米醇溶蛋白活性肽或权利要求8所述功能肽在制备降糖减脂的食品或保健品或制备预防和/或治疗糖尿病及其并发症的药物中的应用。
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