[发明专利]基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法

权利要求书

1.一种基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）以葡萄糖碳点、柠檬酸钠作为还原剂及稳定剂，制备具有拟过氧化酶特性的碳点金纳米酶；

（2）在α-鹅膏毒肽标准溶液中加入碳点金纳米酶溶液，然后加入3,3’, 5, 5’-四甲基联苯胺及H₂O₂，在652nm波长处测定吸光度，确定α-鹅膏毒肽浓度与吸光度的线性关系，得到回归方程；

（3）在待测尿液样品中加入碳点金纳米酶溶液，然后加入3,3’, 5, 5’-四甲基联苯胺及H₂O₂，在652nm波长处测定待测样品液的吸光度，吸光度代入步骤（2）回归方程中，获得尿液样品中α-鹅膏毒肽含量。

2.根据权利要求1所述的基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法，其特征在于：α-鹅膏毒肽标准溶液的终浓度为0.05-5μg/mL，0.01-0.06mg/mL的碳点金纳米酶溶液的添加量为60µL； 1-4mmol/L的3,3’, 5, 5’-四甲基联苯胺的添加量为25µL，10-40mmol/L的H₂O₂添加量为25µL。

3.根据权利要求2所述的基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法，其特征在于，碳点金纳米酶的制备如下：

（1）称取2-3 g柠檬酸、0 .5-1g葡萄糖、50-60μL乙二胺溶于40-50mL超纯水中，超声混合均匀，混合液在160-180℃下加热4-5h后，温度升高至200-220℃继续加热4-5h，反应完成后自然冷却至室温，得棕色溶液；棕色溶液用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，制得葡萄糖碳点；

（2）将质量浓度1-2%的HAuCl₄溶液700-800μL加入到25-30mL的超纯水中，在60-80℃下加热10-15min，再加入0.1-0.5mol/L的柠檬酸钠溶液100-150μL继续加热10-15min后，加入30-50μL葡萄糖碳点，混合5-10s后加入质量浓度1-2%的HAuCl₄溶液300-350μL继续加热10-15min，即得碳点金纳米酶。