[发明专利]一种检测白羽肉鸡MHC Ⅰ类基因多态性的方法在审
申请号: | 202211615759.1 | 申请日: | 2022-12-15 |
公开(公告)号: | CN116162715A | 公开(公告)日: | 2023-05-26 |
发明(设计)人: | 初欢欢;段坤;韩梦;王述柏;李建军;叶晓峰 | 申请(专利权)人: | 烟台大地牧业股份有限公司;青岛农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6869;C12N15/11 |
代理公司: | 北京识然知识产权代理事务所(普通合伙) 11975 | 代理人: | 曾庆国 |
地址: | 265110 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 肉鸡 mhc 基因 多态性 方法 | ||
1.一种用于检测鸡MHCⅠ类基因多态性的巢式PCR引物组合,其特征在于,所述的引物组合中包含有外引物对和内引物对,其中外引物对包含有核苷酸序列为SEQ ID NO:1的上游引物和核苷酸序列为SEQ ID NO:2的下游引物;
外引物对包含有核苷酸序列为SEQ ID NO:3的上游引物和核苷酸序列为SEQ ID NO:4的下游引物。
2.权利要求1所述的引物组合在检测白羽肉鸡的MHCⅠ类基因多态性中的应用。
3.一种检测白羽肉鸡群体MHCⅠ类基因多态性的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1所述的引物组合进行检测。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的方法包括如下的步骤:
1)对待检测的多个白羽肉鸡的血液样品进行抽提,对提取的基因组DNA使用上述的引物对进行巢式PCR扩增,扩增产物纯化后,使用荧光定量仪进行浓度定量;根据定量的浓度进行混样,多个样本建一个文库,通过末端修复、添加接头以及磁珠纯化完成文库构建,并进行测序;
2)首先对测序数据进行预处理,去除Barcode序列,将得到的原始序列拆分成单个样本数据并去除低质量和接头序列,合并双端序列,识别和切除引物序列;然后将reads聚类,去除线粒体、叶绿体来源序列,合并冗余序列后选择丰度>1000的序列进行后续数据分析;
3)数据分析采用生物信息学软件Mega对得到的MHC序列进行比对、计算等位基因数目,完成对白羽肉鸡MHC基因分型。
5.一种与白羽肉鸡葡萄球菌抗性相关的MHCⅠ基因型,其特征在于,所述的基因型的序列为SEQ ID NO:5。
6.权利要求5所述的基因型再筛选与白羽肉鸡葡萄球菌抗性相关的亲本中的应用。
7.一种筛选白羽肉鸡葡萄球菌抗性相关的亲本的方法,其特征在于,所述的方法是筛选基因型为SEQ ID NO:5的个体。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的方法是对待检测的个体进行PCR扩增,扩增产物进行测序后进行基因型的筛选。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述的PCR扩增,其使用的引物对,是核苷酸序列为SEQ ID NO:3的上游引物和核苷酸序列为SEQ ID NO:4的下游引物。
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