[发明专利]一种益生菌微生态制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种包含益生菌的微生态制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将益生菌贝莱斯芽孢杆菌接种于斜面LB培养基于30-37℃进行活化培养16-24h；所述益生菌为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis BzAH-1，

所述的贝莱斯芽孢杆菌，保藏名称：Bacillus velezensis BzAH-1，保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼，保藏日期：2022年10月21日，保藏编号为GDMCC No:62914；

(2)活化后的菌株接种于摇瓶LB培养基，于150-250rpm、30-37℃培养10-16h，制备得到种子液；

(3)将培养后的种子液转移至含发酵培养基的发酵罐中，于500-700rpm、30-37℃培养24-48h，培养过程持续流加补料培养基；

(4)将发酵液进行喷雾干燥，得到含有益生菌的微生态制剂。

2.根据权利要求1所述的包含益生菌的微生态制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述发酵培养基包括如下组分：葡萄糖0.3～5％、豆粕粉1～10％、硫酸铵0.1～1.0％、维生素B₁ 0.0001～0.005％，发酵培养基的pH为6.5～7.0；步骤(3)中，所述补料培养基包括如下组分：玉米浆3-8％、酵母粉5-10％、pH为6.5～7.0。

3.根据权利要求1所述的包含益生菌的微生态制剂的制备方法的，其特征在于，步骤(4)中，所述喷雾干燥步骤如下：在发酵液中加入碳酸钙1.0～5.0％和脱脂米糠5～10％，然后直接进行喷雾干燥，进风口温度180～230℃，出口温度80～100℃。

4.根据权利要求1所述的包含益生菌的微生态制剂的制备方法的，其特征在于：步骤(1)中，所述活化培养步骤为：接种甘油菌于LB固体培养基平板，置于恒温培养箱中30-37℃培养16-24h，至长出直径1-2mm的单菌落。

5.根据权利要求1所述的包含益生菌的微生态制剂的制备方法的，其特征在于：步骤(2)中，所述种子液培养步骤为：选取长势良好的单菌落，接种于100-500mL种子液体培养基中，于150-250rpm、30-37℃培养10-16h，获得菌落数＞10⁹CFU/mL的种子液。

6.根据权利要求1所述的包含益生菌的微生态制剂的制备方法的，其特征在于：步骤(3)中，所述发酵罐培养步骤为：按2-10％接种量移接种子液至发酵罐，起始阶段，控制通气量为0.5-2vvm，搅拌转速为100～300rpm，温度为30～37℃，自然溶氧；后期搅拌转速为500-700rpm，通过控制流加补料培养基，维持发酵罐中的糖含量为4～8g/L进行发酵，发酵的周期为24～48h。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法制备的的包含益生菌的微生态制剂。

8.权利要求4所述的包含益生菌的微生态制剂的应用，其特征在于，所述微生态制剂在禽类饲料中的添加量为50～500mg/kg。