[发明专利]一种小球藻蛋白多肽肠溶缓释微囊的制备方法

说明书

本发明公开了一种小球藻蛋白多肽肠溶缓释微囊的制备方法，对蛋白核小球藻进行酶解破壁后提取其中的蛋白质，再经酶解将蛋白水解为多肽，并用醇沉进行分离除杂，干燥得到多肽粉，进而在乳化分散体系中用海藻酸钠‑壳聚糖‑三聚磷酸钠的固化和二次交联制备小球藻蛋白多肽肠溶缓释微囊。本发明通过微囊化技术制备的小球藻蛋白多肽微囊具有抗癌活性，同时在胃液环境中不易溶出，在肠液中稳定释放，达到肠道内可控缓释的效果。本发明制备工艺简单，易于扩大生产。

技术领域

本发明涉及小球藻缓释胶囊制备技术领域，尤其涉及一种小球藻蛋白多肽肠溶缓释微囊的制备方法。

背景技术

小球藻是一种普生性球形单细胞藻类，属于绿藻门、绿藻纲、绿球藻目、卵囊藻科、小球藻属，直径3～8微米，是地球上最早的生命之一，出现在20多亿年前，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，分布极广。小球藻易于培养，不仅能利用光能自养，还能在异养条件下利用有机碳源进行生长、繁殖；并且生长繁殖速度快，是地球上动植物中唯一能在20h增长4倍的生物。小球藻富含营养，高蛋白、低脂肪、低糖、低热量，其维生素、矿物质元素含量也十分丰富，具有很高的应用价值。在我国，常见的种类有蛋白核小球藻、椭圆小球藻、普通小球藻等，其中蛋白核小球藻蛋白质含量最高，营养价值最高。2012年我国卫生部将蛋白核小球藻列为新资源食品。

生物活性肽是由几个到几十个氨基酸残基构成的活性分子，其来源非常广泛，如牛奶和奶制品、鸡肉和鸡蛋、鸭肉和鸭血、鱼、牡蛎、谷物(大米、小麦、大豆、荞麦、大麦和玉米)和种子。现代营养学研究发现，人类摄食蛋白质经消化道的酶作用后，大多是以低肽形式消化吸收的，以游离氨基酸形式吸收的比例很小。进一步的试验又揭示了肽比游离氨基酸消化更快、吸收更多。生物活性肽有多种多样的生理功能，能够有益地调节一系列与增进健康相关的生物标记物。近年来，大量文献证明生物活性肽对血压和脂质代谢具有潜在影响，此外还有抗菌、镇痛、抗氧化、抗炎等活性。

癌症是由正常细胞异常增殖引起的疾病，通常表现为细胞生长失控，最终损害正常细胞功能。多肽通过诱导癌细胞凋亡、下调PI3K/Akt信号通路、抑制癌细胞增殖和促进血管生成而具有显著的抗癌活性。与常见的抗癌药物相比，多肽分子量小、易被吸收、特异性强，近几年在癌症治疗方面备受关注。

蛋白多肽类药物主要有冻干粉针及溶液型注射剂两种剂型，此类药物具有半衰期短，需要长时间给药的缺点。大多数蛋白多肽类药物容易被生物酶降解，而且生物稳定性差，口服给药的生物利用低，其应用受到限制。微囊是指采用天然或者合成的高分子材料将固体或液体药物包封形成微小囊状的粒子。微囊法具有改善口感、延长药物的作用时间、增加药物的稳定性、减少胃刺激性、固化液态药物以防药物损失、便于存用、易制成缓控释制剂、靶向制剂和提高生物利用度等优点。近年来，微囊法已被广泛地应用于蛋白多肽类药物制剂的生产中，一些产品已经在临床上取得了良好的效果。

中国专利CN202110167140.8提供了一种蛋白核小球藻抗氧化肽及其制备方法，以蛋白核小球藻为原料，通过蛋白核小球藻粉破壁处理，提取小球藻蛋白，制备小球藻多肽，分离纯化小球藻多肽，冷冻干燥，得到蛋白核小球藻抗氧化肽。该方案采用高压均质设备、超滤设备和冷冻设备，功耗高，成本高，不利于推广生产。

中国专利CN201210318091.4提供了一种小球藻抗肿瘤多肽的制备方法，首先采用低温超高压连续流细胞破碎机提取小球藻蛋白，再用胰蛋白酶水解小球藻蛋白，超滤离心管过滤，获得分子量大小范围为0-3KD、3-5KD、5-10KD以及大于10KD的小球藻多肽。该方法采用细胞破碎机处理小球藻，成本高，需要额外购买专用设备，不利于工业生产；且采用单一酶酶解处理小球藻蛋白，酶解点位少，转化收率低。