[发明专利]一种抗菌肽WRKB7及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202211539371.8 | 申请日: | 2022-12-02 |
| 公开(公告)号: | CN115925797A | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
| 发明(设计)人: | 魏辅文;赖仞;周文良;王爱丽 | 申请(专利权)人: | 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州) |
| 主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K1/04;C07K1/16;C07K1/28;C07K1/36;A61K38/08;A61K8/64;A61Q19/00;A61P17/00;A61P29/00 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 赵晓琳 |
| 地址: | 511458 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 抗菌 wrkb7 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗菌肽WRKB7,其特征在于,所述抗菌肽WRKB7的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.权利要求1所述抗菌肽WRKB7的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据SEQ IDNo.1所示氨基酸序列使用固相合成法合成粗多肽。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,在合成粗多肽后,还包括对所述粗多肽进行纯化;所述纯化包括高效液相色谱纯化。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述高效液相色谱纯化包括:将所述粗多肽溶于体积浓度为0.1%的三氟醋酸水溶液中,得到待测样品,待测样品上样,采用二元流动相进行梯度洗脱,于25℃条件下检测波长215nm;
所述二元流动相包括流动相A和流动相B;所述流动相A为体积浓度为0.1%的三氟醋酸水溶液;所述流动相B为体积浓度为0.1%的三氟醋酸乙腈溶液;
所述梯度洗脱的程序为:在30min内,流动相B在洗脱剂中的含量从0%~80%按线性关系增长;
所述梯度洗脱的洗脱剂流速为1mL/min;
所述高效液相色谱纯化的色谱柱为硅胶烷基键合相C18柱。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,在对所述粗多肽进行纯化后,还包括测定纯化后的多肽的分子量和等电点。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述测定纯化后的多肽的分子量包括使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定纯化后的多肽的分子量;
所述使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定纯化后的多肽的分子量包括:
将纯化后的多肽溶于去离子水中,得到纯化多肽溶液;
将所述纯化多肽溶液和饱和基质溶液混合,得到待测样本;
使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定所述待测样本的分子量;
所述纯化多肽溶液中纯化多肽的浓度为1μmol/mL;
所述纯化多肽溶液和饱和基质溶液的体积比为1:1;
所述饱和基质溶液的制备方法包括:
将α-氰基-4-羟基肉桂酸溶于乙腈溶液中,制成制成饱和溶液,离心,取上清液,得到饱和基质溶液;
所述乙腈溶液以体积浓度为50%的乙腈水溶液为溶剂,含有体积浓度为0.1%三氟醋酸。
7.权利要求1所述抗菌肽WRKB7或者权利要求2~6任意一项所述制备方法制备得到的抗菌肽WRKB7在制备抗菌和/或抗氧化的产品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述抗菌的菌的种类包括金黄色葡萄球菌和/或大肠杆菌。
9.权利要求1所述抗菌肽WRKB7或者权利要求2~6任意一项所述制备方法制备得到的抗菌肽WRKB7在制备治疗皮肤炎症的药品中的应用。
10.一种化妆品或药品,其特征在于,含有权利要求1所述抗菌肽WRKB7或者权利要求2~6任意一项所述制备方法制备得到的抗菌肽WRKB7。
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