[发明专利]一类葶苈子黄酮组分、其提取方法和在制备治疗或预防抗心力衰竭药物中的应用

说明书

本发明涉及中药技术领域，公开一类葶苈子黄酮组分、提取方法和在制备治疗或预防抗心力衰竭等线粒体结构功能障碍相关疾病药物中的应用，提取过程包括，制备葶苈子浓缩液，再将浓缩液经在吸附柱用水、15‑60％乙醇洗脱，收集15‑60％乙醇洗脱液，浓缩干燥得到所述葶苈子黄酮组分，经液相色谱分离得到槲皮素‑3‑O‑β‑葡萄糖‑7‑O‑β‑D‑龙胆双糖苷。本发明首次提出葶苈子黄酮组分和槲皮素‑3‑O‑β‑葡萄糖‑7‑O‑β‑D‑龙胆双糖苷可分别作为活性组分/成分能显著改善心肌细胞内ROS水平，细胞活力，线粒体膜电位，线粒体生物能以及丙二醛水平，在制备治疗心力衰竭等心血管相关疾病药物方面具有一定的开发潜力。

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体属于中药有效成分的提取与药理活性研究，具体涉及一类葶苈子黄酮组分、提取方法和在制备治疗或预防抗心力衰竭药物中的应用。

背景技术

心力衰竭(Heart failure)是一个长期存在且棘手的公共卫生问题。心力衰竭的典型临床症状是由液体潴留和心排血量低引起的肺充血和外周水肿。在心衰的进展过程中，心肌的结构和功能异常不仅与交感神经系统和肾素-血管紧张素醛固酮系统的异常激活有关，还与活性氧(reactive oxygen species,ROS)的过量产生有关。ROS主要来源于线粒体电子传递链，ROS水平增加会引起过度的氧化应激，以DNA损伤、蛋白质氧化和脂质过氧化为特征，进而导致细胞功能障碍。事实上，越来越多的证据表明，细胞内过量的ROS和(或)内源性抗氧化系统失衡引起的氧化应激与心力衰竭的进展有紧密联系。

心脏的正常工作需要大量的能量，线粒体在氧化磷酸化提供这些能量的同时也产生线粒体ROS(mROS)。氧化应激发生时，mROS产生增加，同时线粒体过度分裂，导致线粒体的结构损伤和功能障碍。换句话说，在过度的氧化应激下，受损的线粒体堆积，线粒体通透性过渡孔打开，导致钙超载，线粒体膜电位降低，线粒体生物能发生损伤，细胞凋亡。特别地，心肌细胞属于高耗能细胞，维持线粒体的结构和功能完整心肌细胞的正常功能十分重要。因此，靶向心肌细胞内的mROS被认为是一种有前途的治疗心衰的选择。

心肌细胞内存在多种抗氧化系统来防御氧化应激损伤。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)或蛋白激酶B(AKT)作为核因子红系2相关因子2(Nrf2)的上游信号，与细胞抗氧化防御系统相关。Nrf2转录因子是应激信号的重要转录因子，它在生理条件下与胞质接头蛋白(Keap1)结合。当氧化应激等刺激发生时，Nrf2进入细胞核并与血红素加氧酶-1(HO-1)等抗氧化基因的启动子区结合，HO-1可表达细胞II相解毒酶来清除有毒的血红素，产生胆绿素、铁和一氧化碳。HO-1及其产物通过调节氧化损伤、细胞凋亡和炎症发挥保护作用。在心力衰竭中，HO-1与调节线粒体功能相关的心脏保护作用已被阐明。

中药具有独特的理论体系、能够对机体进行整体调节且耐药性低。葶苈子的来源有十字花科植物播娘蒿(Descurainia sophia(L.)Webb.ex Prantl)的干燥成熟种子。味辛、苦，性大寒。归肺，膀胱经。具有泄肺平喘，行水消肿等功效。多用于痰涎壅肺，喘咳痰多，胸胁胀满，不得平卧，小便不利等证候，主要用于治疗各种肺部炎症和水肿。

葶苈子常与其他中药成分组合使用对心力衰竭起到一定效果，如CN103202879A公开了一种治疗慢性心力衰竭的中药组合物及其制备方法，包括黄芪、桂枝、丹参、当归、人参、红花、益母草、葶苈子、茯苓、三七等中药主料和药用辅料，通过益气活血化瘀、温阳利水法，改善心力衰竭患者的临床症状，提高心肌收缩力等。近年来针对葶苈子的心血管药理学研究多集中在动物模型上，尚未有研究报道葶苈子是否能抗心肌细胞氧化应激线粒体损伤。且葶苈子中成分复杂，其主要成分为黄酮类、糖类及硫苷类等。其某一些单独组分的活性特征研究也尚浅，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷是葶苈子药材的特征成分和指标性成分，属于黄酮类化合物，CN107602629A公开了一种从北葶苈子中提取硫苷黄酮类化合物及其应用，发现北葶新黄酮A和北葶新黄酮B具有雌激素样作用，但尚无相关的研究表明葶苈子黄酮组分或槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷在心肌细胞氧化应激损伤上是否有效。