[发明专利]多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂

说明书

本发明涉及医学检测领域，尤其涉及多糖类抗原‑抗体免疫复合物解离剂。本发明提供了一种多糖类抗原‑抗体免疫复合物解离剂，所述解离剂包括酸性解离液和碱性中和液，所述酸性解离液包括强酸和两性表面活性剂，pH为‑1.0～2.0，所述碱性中和液包括缓冲碱、混合碱。本发明采用的解离剂能使多糖类抗原‑抗体复合物迅速解离，由于多糖类抗原耐热、耐酸碱，所以仍然保持生物活性，使抗体不可逆失活，消除了抗体对多糖类抗原检测的影响，实现了基于免疫学方法自动化、灵敏、准确检测多糖类抗原的效果。采用本发明所提出的解离剂处理相关样品，效果明显优于商品化试剂盒的处理效果，具有较好的市场化前景。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，尤其涉及多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂。

背景技术

真菌感染机体后，与宿主的免疫抗体形成抗原抗体复合物，免疫抗体占据了多糖类抗原的表位，限制了免疫学方法检测多糖类抗原的灵敏度。现有解离方法常采用EDTA-2Na加热处理血液样本，再进行免疫学检测，以BioRad公司的念珠菌甘露聚糖检测产品为例，首先将样本与EDTA-2Na溶液以3：1比例涡旋混匀，在100℃加热处理3min，10000g，4℃离心10min，取上清进行免疫学检验，该操作繁琐，所需设备较多，样本量多时更增加检测负担，检测效率低。

相关研究公开了一种抗原抗体免疫复合物解离方法，首先往样品中添加1.5M～3M范围内的氯化钠，置于45℃～70℃作用5min～20min，再添加解离剂对抗原抗体复合物进行解离，解离剂中含有5M～6M的尿素、3.0％～7.0％的Tween 80、0.5％～3.0％的TritonX100；这种解离剂有效实现了待检血清或血浆样本中病原抗原抗体复合物的迅速解离，提高了抗原的绝对浓度值，增加了待检样本的检测灵敏度，但该解离液需要在固定温度下处理样本，且不适用于多糖类抗原-抗体免疫复合物的解离。

因此，有必要针对多糖类抗原-抗体免疫复合物，配制高效的解离液，提高多糖类抗原检测的灵敏度，使多糖类抗原检测样本前处理实现自动化。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂，本发明提供了多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂。

本发明提供了多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂，其包括酸性解离液和碱性中和液；所述酸性解离液包括强酸和表面活性剂；

所述碱性中和液选自：磷酸三钠溶液、Lochmann-Schlosser试剂(叔丁基锂和叔丁醇钾混合物)、磷酸三钾溶液、碳酸钠溶液、碳酸钾溶液、碳酸氢钾溶液、碳酸氢钠溶液、二异丙醇胺、乙醇钠、叔丁醇钾或Tris-HCL缓冲液中任意一种或两种以上的组合；

所述强酸选自盐酸、硝酸、高锰酸、柠檬酸或硫酸中任意一种或两种以上的组合；

所述表面活性剂选自：十八烷基二羟乙基氧化胺、N,N-二甲基-N-(3-硫代丙基)-十六烷基铵内盐、溴化-N,N,N-三甲基-1-十二胺或N,N-二甲基-N-(3-磺丙基)-1-十八烷铵内盐中任意一种或两种以上的组合。

本发明提供的所述的多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂中，

所述酸性解离液为盐酸；

所述表面活性剂为十八烷基二羟乙基氧化胺；

所述碱性中和液为含有磷酸三钠的Lochmann-Schlosser试剂；所述碱性中和液的pH值为12.0～15.0；一些实施例中，所述碱性中和液的pH值为12.0、13.0、14.0、15.0。本发明采用pH为12.0～15.0的中和液调节样本pH，可以快速中和酸性解离液，使样本pH到达7.0左右，且能有效避免试剂氧化，开瓶稳定性优良，更有利于后续进行多糖类抗原的免疫检测。

本发明所述的多糖类抗原-抗体免疫复合物解离剂中，