[发明专利]磷酸西格列汀有关物质检测方法

说明书

本发明涉及磷酸西格列汀有关物质检测方法，柱温为30℃，流动相的流速1.0ml/min，检测波长205nm，固定相为氰基硅烷键合硅胶，流动相为流动相A和B；流动相A为磷酸盐缓冲溶液中加离子对试剂，用酸调节pH值；流动相B为乙腈，梯度洗脱；稀释液；混合杂质储备液：称取杂质B、C、D、E、F、G稀释，取1.0ml所得混合液稀释；系统适用性溶液：磷酸西格列汀和混合杂质储备液稀释；样品溶液：取磷酸西格列汀样品稀释；样品溶液注入高效液相色谱仪，按主成分自身对照法计算磷酸西格列汀中有关物质的含量。可以将磷酸西格列汀中的有关物质在同一色谱条件下高效分离，有效控制原料药的质量，专属性好、准确性强、精度高，室温操作。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种磷酸西格列汀有关物质检测方法。

背景技术

2型糖尿病是糖尿病分型之一，是最常见的糖尿病类型。由胰岛素抵抗、胰岛素不能被充分利用、胰岛素分泌相对不足引起血糖水平升高而导致，多发生于成年之后，占所有糖尿病人群的90％以上，2型糖尿病患者还会出现很多临床并发症，包括糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变，还有脑卒中和心肌梗死等。2型糖尿病的治疗以提升胰岛素敏感性为主要治疗手段，以口服降糖药为主，当2型糖尿病患者胰岛功能严重受损时，则需要补充外源性胰岛素。

西格列汀是一种有效和高度选择性的西格列汀二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂，能够以葡萄糖依赖的方式增加胰岛素释放并降低胰高糖素水平，用于治疗2型糖尿病疗效显著且安全性高。

西格列汀化学名为(R)-3-氨基-1-(3-(三氟甲基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)-4-(2,4,5-三氟苯基)丁烷-1-酮，化学结构式：

磷酸西格列汀是默沙东制药在美国新泽西州市默克研究实验室通过筛选了80余万种化合物，通过合成改良2000多个化合物研制开发的一种高选择性小分子二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂小分子，该化合物先是在动物研究中显示改善血糖控制和胰岛功能，通过毒理和安评之后，很快也进入临床试验，并改称西格列汀。

在临床研究阶段，默沙东的科学家们仅用2年又1个季度的时间证实口服单药或与二甲双胍及其他降糖药物联用西格列汀均可显著改善血糖控制。2006年10月17日FDA正式批准西格列汀(商品名，捷诺维)上市，成为第一个在全球获得批准的DPP-4抑制剂，同时也开创了应用列汀(-gliptin)类治疗糖尿病的新时代。

目前，磷酸西格列汀原料药在EP和USP中均有收录，其有关物质检测方法中流动相为乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至2.0)(体积比15∶85)，流动相洗脱为等度洗脱，缺点在于：

①各杂质保留时间不稳定；

②杂质D、E以及杂质F、G分离效果不佳；

③检测时间过长。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种磷酸西格列汀有关物质检测方法，以克服上述现有技术中的不足。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种磷酸西格列汀有关物质检测方法，包括如下步骤：

色谱条件：

色谱柱柱温为30℃，流动相的流速为1.0ml/min，检测波长205nm，固定相为氰基硅烷键合硅胶，流动相为流动相A和流动相B；流动相A为磷酸盐缓冲溶液中加离子对试剂，用酸调节pH值至2.0；流动相B为乙腈，梯度洗脱；

溶液配制：

稀释液：乙腈和水；