[发明专利]菘蓝中螺二烯酮木脂素化合物的制备方法及其应用

说明书

菘蓝中螺二烯酮木脂素化合物的制备方法及其应用，属于医药技术领域，具体涉及从十字花科菘蓝属植物菘蓝(Isatis indigotica Fortune)中提取分离的3个螺二烯酮木脂素化合物，它们具有相同的螺二烯酮木脂素母核，本发明还涉及该类新化合物的制备方法，以及其在制备治疗神经退行性疾病的新用途。本发明制备方法简单易行，重现性比较好，纯度较高。获得的化合物具有良好的神经保护活性作用。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及植物菘蓝中制备螺二烯酮木脂素化合物的方法及这类化合物在神经保护方面的应用。

背景技术

菘蓝：菘蓝[Isatis indigotica Fortune]，十字花科菘蓝属，是一种二年生草本植物，在我国南北方均有分布和栽培。菘蓝叶是一种著名的清热解毒中药，被广泛用于治疗瘟疫和流感，最初记载于《民医别录》；《中华人民共和国药典》2020年版分别将菘蓝的干叶和干根称为“大青叶”和“板蓝根”，其干燥叶作大青叶入药，干燥根作板蓝根入药。性寒，味苦。

随着全球人口老龄化的进程，神经退行性疾病受到越来越多的关注，其中阿尔茨海默氏症(AD)和帕金森症等正成为导致中老年人死亡的主要杀手。近年来的研究表明，抑制活性氧引起的细胞损伤的活性化合物可能有助于预防和治疗AD。因此，探索具有潜在神经保护的天然成分具有重要意义，对于治疗神经退行性疾病有着很好的研究前景。

发明内容

本发明的首要目的是提供3种从十字花科菘蓝属植物菘蓝[Isatis indigoticaFortune]中分离得到的螺二烯酮木脂素化合物，结构如图所示：

本发明的制备技术方案包括如下步骤：

取干燥的菘蓝全草以70-80％工业乙醇提取，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用二氯甲烷萃取并将所得组分经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇系统100:1-3:1进行等度梯度洗脱，共收集到4个流分1-4。

流分3经聚酰胺柱色谱，以乙醇-水系统0:100-90:10进行梯度洗脱，得三个组分A-C。利用HP20柱色谱将组分A以乙醇-水系统0:100-90:10进行梯度洗脱，得三个亚组分A1-A3。

所得亚组分A2经ODS柱以乙醇-水系统10:90-90:0进行梯度洗脱，得到两个亚组分A2.1-A2.2。

在制备性和半制备性反相高效液相色谱上使用甲醇-水流动相来分离A2.1得到化合物1a/1b-2。其中化合物1使用手性色谱柱对其进行拆分得到的一对对映异构体1a/1b。

所述的制备方法，所述提取为加热回流提取，提取2-3次，每次3-4小时。

所述的制备方法，使用的菘蓝为十字花科菘蓝属植物菘蓝[Isatis indigoticaFortune]。

所述的制备方法，在制备性和半制备性反相高效液相色谱上使用甲醇-水(20:80，v/v)的流动相来分离A2.1得到化合物1-2。

所得化合物经过系统结构鉴定结果如下：

利用高分辨质谱，一维NMR、二维NMR及计算ECD对化合物1-2的结构鉴定，如图1-17。

sibiricumin 1a/1b黄色油状物(甲醇)。HRESI-MS给出准分子离子峰607.2158[M+Na]⁺(calcd for C₃₁H₃₆O₁₁Na 607.2150)，结合¹H,¹³C NMR数据确定化合物分子式为C₃₁H₃₆O₁₁，计算化合物的不饱和度为14。