[发明专利]一种非诊断目的基于MoS2 在审
申请号: | 202211470646.7 | 申请日: | 2022-11-23 |
公开(公告)号: | CN115753915A | 公开(公告)日: | 2023-03-07 |
发明(设计)人: | 李桂银;许沛鸿;王博;李江涛;周治德;谭晓红 | 申请(专利权)人: | 广东石油化工学院 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26;G01N27/327;G01N27/48 |
代理公司: | 厦门市宽信知识产权代理有限公司 35246 | 代理人: | 巫丽青 |
地址: | 525000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诊断 目的 基于 mos base sub | ||
一种非诊断目的基于二硫化钼‑二茂铁@聚苯胺MoS 2‑Fc@PANi纳米复合材料检测GP73的方法,将纳米金AuNPs修饰在丝网印刷电极SPE表面,再通过π‑π共轭和静电吸附作用固定GP73适配体,以二硫化钼‑二茂铁@聚苯胺MoS 2‑Fc@PANi为载体,制备MoS 2‑Fc@PANi‑GP73 Apt信号探针,构建夹心型电化学适配体传感器。通过MoS 2‑Fc@PANi中Fc的氧化还原特性,采用电化学工作站的DPV进行扫描,记录其峰电流,实现对GP73的检测。
技术领域
本发明属于生物检测领域,具体涉及一种基于纳米复合材料构建夹心型适配体传感器检测GP73的方法。
背景技术
原发性肝细胞癌(HCC)是全球五大癌症之一,对生命健康威胁巨大。高尔基体蛋白73(GP73)是一种新型肝癌标志物,检测方法主要有放射免疫分析法、荧光免疫分析法、电化学免疫传感器、压电免疫传感器等。公开号CN 111413502A的发明专利,涉及一种采用商业ELISA试剂盒血清检测GP73的方法;公开号CN 113945713 A的发明专利,涉及一种利用新型生物芯片检测GP73等肿瘤标记物的方法,满足了大规模样本检测的需求。但是现有技术还存在GP73的检测灵敏度低、操作复杂、成本高等缺点。因此,需要一种快速灵敏、操作简单的GP73检测方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种基于二硫化钼-二茂铁@聚苯胺(MoS2-Fc@PANi)的纳米复合材料,构建夹心型适配体传感器,实现GP73检测,最低检测限为0.001ng/mL。
为解决该技术问题,利用酰胺键、π-π键吸附作用,成功合成具有高比表面积、高电导率的纳米复合材料,并通过π-π键作用的方式将纳米复合材料与GP73适配体(GP73Apt)结合,形成可与GP73特异性结合的MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针;采用电沉积技术将金纳米粒子(Au NPs)修饰在丝网印刷电极(SPE)表面;通过静电吸附作用将GP73Apt负载在修饰AuNPs的电极表面,适配体以单链形式形成不稳定的空间结构而存在电极表面;将GP73和MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针孵育在上述电极表面,由于GP73能够与GP73适配体特异性结合,形成稳定的空间结构,有序排列在电极表面,构建了MoS2-Fc@PANi-GP73Apt/GP73/GP73Apt/AuNPs/SPE夹心型电化学适配体传感器。通过差分脉冲伏安法(DPV)记录MoS2-Fc@PANi中Fc的氧化还原峰电流变化值,从而实现对GP73的检测。
本发明按照以下步骤进行:
步骤1:MoS2-Fc@PANi-GP73Apt信号探针的制备
(1)二茂铁@聚苯胺(Fc@PANi)的制备:将Fc和PANi加入到乙酸(CH3COOH)溶液中混合,再加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),搅拌、离心,清洗,得到Fc@PANi固体;
作为改进,还包括以下步骤:
(2)二硫化钼-二茂铁@聚苯胺(MoS2-Fc@PANi)的制备:二硫化钼(MoS2)加水超声破碎,制备出MoS2悬浊液,再加入Fc@PANi,搅拌,离心,清洗,得到MoS2-Fc@PANi溶液;
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