[发明专利]一种非诊断目的基于MoS2

权利要求书

1.一种非诊断目的基于二硫化钼-二茂铁@聚苯胺MoS₂-Fc@PANi纳米复合材料检测GP73的方法，按以下步骤进行：

步骤1：二硫化钼-二茂铁@聚苯胺-GP73适配体MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt信号探针的制备

(1)二茂铁@聚苯胺Fc@PANi的制备：二茂铁Fc和聚苯胺PANi加入到乙酸CH₃COOH溶液中，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS，搅拌、离心、清洗，得Fc@PANi固体；

(2)二硫化钼-二茂铁@聚苯胺MoS₂-Fc@PANi的制备：二硫化钼MoS₂倒入纯水中破碎，加入Fc@PANi固体，搅拌，离心，清洗，得MoS₂-Fc@PANi溶液；

(3)MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt信号探针的制备：将GP73适配体GP73_Apt溶液和MoS₂-Fc@PANi溶液均匀混合，孵育、离心、清洗，得MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt 信号探针；

步骤2：电极的修饰与生物传感界面的构建

(1)将丝网印刷电极SPE置于稀H₂SO₄溶液中活化；

(2)将活化后的SPE置于含有HAuCl₄的溶液中，进行电沉积，得AuNPs/SPE；

(3)将GP73_Apt滴加在AuNPs/SPE表面，孵育、洗涤、吹干，得GP73_Apt/AuNPs/SPE；

步骤3：GP73工作曲线的绘制

(1)将GP73标准液滴加到GP73_Apt/AuNPs/SPE表面，孵育、清洗、吹干，得GP73/GP73_Apt/AuNPs/SPE；

(2)在GP73/GP73_Apt/Au NPs/SPE上滴加MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt溶液，孵育、清洗、吹干，得到电极MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt/GP73/GP73_Apt/Au NPs/SPE；

(3)将工作电极浸入磷酸缓冲溶液PBS中，采用电化学工作站的DPV扫描，记录传感器的响应电流；

(4)分别对不同浓度的GP73进行检测，记录峰值电流；根据传感器的电流响应值与GP73浓度的关系，绘制GP73的工作曲线，计算出该方法的最低检测限；

步骤4：实际血清样本中GP73的检测

(1)用实际血清样本制备的工作电极浸入到PBS溶液中，采用电化学工作站的DPV进行扫描，记录传感器的响应电流值；

(2)根据步骤3所得到的工作曲线，计算得到所述实际血清样本中GP73浓度。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1中所述MoS₂-Fc@PANi纳米复合材料浓度为1.0mg/mL。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1中所述MoS₂-Fc@PANi-GP73_Apt信号探针浓度为0.5mg/mL。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1和步骤2中所述GP73_Apt 的DNA序列为5’-GCAGTTGATCCTTTGGATACCCTGG-3’，浓度为5.0μM。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3和步骤4中所述PBS溶液的浓度为0.2M，pH值为7.0。