[发明专利]一种植物乳杆菌冻干保护剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将银耳多糖溶液与酪蛋白溶液混合，进行湿热接枝反应，即得。

2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述银耳多糖溶液的制备方法为：取银耳多糖加水配置成溶液，超声处理，即得。

3.根据权利要求2所述的植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述超声功率为240～480W，超声温度为30℃，超声时间为2～10min。

4.根据权利要求1所述的植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述酪蛋白溶液的制备方法为：将酪蛋白溶解在pH7.0的PBS缓冲液中，搅拌使其充分溶解，即可。

5.根据权利要求1所述的植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述银耳多糖溶液与所述酪蛋白溶液的质量浓度为4％，所述银耳多糖溶液与酪蛋白溶液的混合比例为3:1～7:1。

6.根据权利要求1所述的植物乳杆菌冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述湿热接枝反应的条件为：反应温度为120℃，反应pH为7.0，反应时间为10～30min。

7.权利要求1～6任一项所述的制备方法制得的植物乳杆菌冻干保护剂。

8.权利要求7任一项所述的植物乳杆菌冻干保护剂在植物乳杆菌冻干粉制备中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将植物乳杆菌活化，接种和扩大培养，得植物乳杆菌培养液，所述植物乳杆菌培养液离心，得到菌泥；所述菌泥洗涤后重悬于无菌蒸馏水中得到菌悬液备用；

(2)将步骤(1)的菌悬液和权利要求1～6任一所述的植物乳杆菌冻干保护剂充分混合形成混合物；

(3)将步骤(2)的混合物冷冻干燥，即得所述植物乳杆菌冻干粉。

9.根据权利要求8所述的植物乳杆菌冻干保护剂在植物乳杆菌冻干粉制备中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将存放于-20℃环境下冷冻保存的植物乳杆菌进行活化，接种在MRS培养基中37℃条件下进行厌氧培养，得到种子液；种子液放大培养，按3％的接种量接种在MRS培养基中，于37℃条件下厌氧培养至对数末期，得到植物乳杆菌培养液，在4500r/min、4℃条件下离心10min，收集菌泥；将收集到的菌泥重悬于同体积的无菌蒸馏水中得到菌悬液备用，同时用平板计数法对该菌液计数；

(2)将步骤(1)的菌悬液和权利要求1～6任一所述的植物乳杆菌冻干保护剂在室温下充分搅拌混合30min，得到混合物；

(3)取一个无菌专用容器，加入步骤(2)的混合物50g，于-80℃预冻2-3小时，取出预冻的混合物置于温度为-50℃至-55℃、真空度为6.0-7.0Pa的环境中，冷冻干燥48h，得到植物乳杆菌冻干粉。

10.根据权利要求8所述的植物乳杆菌冻干保护剂在植物乳杆菌冻干粉制备中的应用，其特征在于：步骤(2)的混合物中，所述菌悬液与所述植物乳杆菌冻干保护剂的质量比为1:5。