[发明专利]一种雨生红球藻破壁粉及其制备方法

说明书

本发明涉及保健食品领域，具体为一种雨生红球藻破壁粉及其制备方法。该雨生红球藻破壁粉采用珠磨法、酶解法、纳米粒子负载膜进行催化降解、超声法相结合提高雨生红球藻的破壁率，进而提高虾青素含量。本发明添加斑马螺酶，斑马螺的多糖水解酶是复合酶，作为溶解雨生红球藻细胞壁的工具，促进酶解，从而达到破壁的目的。本发明制得的雨生红球藻破壁粉作为一种保健食品，有助于增强人体免疫力，改善体质。

技术领域

本发明涉及保健食品领域，尤其是一种雨生红球藻破壁粉及其制备方法。

背景技术

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是一种单细胞淡水绿藻，隶属绿藻纲(Chloro-phyceae)、团藻目(Volvocales)、红球藻属(Haematococcus)，在培养过程中，在氮源充足时，可以促进细胞生长；在氮源缺乏时，则能刺激细胞产生并在体内积累虾青素。雨生红球藻生产虾青素具有细胞繁殖快、培养简单、易于提取的特点，且藻粉可直接应用于食品及饲料工业，降低成本，因此被认为是一种很有虾青素生产前景的微藻。

由于雨生红球藻厚壁孢子具有厚且致密的孢粉质细胞壁，当利用传统的溶剂萃取时，这层孢粉质细胞壁阻碍了溶剂进入细胞内部，大大降低了虾青素油脂的提取效率，因此在提取虾青素油脂时，必须对雨生红球藻进行破壁处理。目前，研磨、超声波、微波和酸解等物理或化学方法用于雨生红球藻厚壁孢子的破壁处理已有一些研究，然而，这些破壁方法要么极易导致虾青素被破坏，要么破壁不完全，虾青素溶出率低。因此，开发一种新型的对虾青素破坏率低的雨生红球藻破壁方法是十分有必要的。

CN106072085A公开了一种雨生红球藻破壁粉的制备方法，该雨生红球藻破壁粉的制备方法，包括以下步骤：(1)将雨生红球藻泥与酸液的按质量比为(1-3)：(1-3)均匀混合，放置40-80分钟，过滤，得到酸解料；(2)将酸解料与醇液按质量比为(1-3)：(1-3)混合，用均质机进行破壁，得到混合料，冻干，即得。本发明公开了一种雨生红球藻破壁粉的制备方法，破壁率高，能有效保护生物活性成分。但是采用酸进行破壁处理，易破坏虾青素，且破壁率有待进一步提高。

发明内容

针对现有技术存在的缺陷，本发明提供了一种雨生红球藻破壁粉的制备方法。

一种雨生红球藻破壁粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)雨生红球藻细胞培养：取保存的雨生红球藻藻种活化，湿藻接种于3N-BBM培养基，接种量为10-20wt％，持续以40-60μmol/m²/s光强光照，并通入含0.5-2wt％二氧化碳的空气，持续培养6-10天，收集雨生红球藻，将雨生红球藻转入不含氮的BBM培养基，接种量为20-40wt％，持续以100-200μmol/m²/s光强光照，并通入含0.5-2wt％二氧化碳的空气，再培养6-10天，获得成熟的红色厚壁孢子，离心收集细胞，得到含水量为70-80wt％的湿藻生物质；

(2)按质量份计，取5-15份步骤(1)制得的湿藻生物质，采用珠磨法进行一次破壁，所述珠磨法采用直径为0.1-1mm的氧化锆珠，操作压力为170-180MPa，时间为15-25min，接着，向其中加入5-15份无水乙醇，以100-150r/min转速搅拌3-5min，然后，采用孔径15-30μm的滤膜过滤，得到一次滤渣和一次滤液；

(3)将步骤(2)制备得到的一次滤渣、斑马螺酶加入水混合均匀，调节pH至6-7，然后加热至25-30℃反应30-60min，然后，采用孔径15-30μm的滤膜过滤，得到二次滤渣和二次滤液，其中一次滤渣、斑马螺酶、水的质量比为1：(0.002-0.005)：(8-15)；

(4)按质量份计，取0.5-1.5份步骤(3)中的一次滤渣、0.05-0.15份酸和5-15份水混合，经纳米粒子负载膜过滤，以50-150μmol/m²/s光强的紫外光照射，1-2kPa压力下过滤40-80min，过滤结束，将滤渣和滤液混合，得到细胞壁薄化的雨生红球藻；