[发明专利]黄瑞香中的三萜类化合物及其制备方法和应用

说明书

黄瑞香中的三萜类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域，具体涉及从瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香属(Daphne L.)植物黄瑞香(Daphne giraldii Nitsche)植的干燥根皮、茎中提取分离得到的3个新的三萜类化合物，通过将黄瑞香粗提物经硅胶柱色谱，快速将其分成五个粗流份，依次通过聚酰胺柱色谱，HP20柱色谱，ODS柱色谱，HPLC分离的色谱方法进行分离。本发明还通过测试上述化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性，确定所述三萜类化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性，本发明提供的新三萜类化合物可在制备治疗和/或预防阿尔茨海默症药物中应用。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及从瑞香属药用植物黄瑞香中分离得到的3个三萜类化合物，并提供了其在抗乙酰胆碱酯酶方面的用途。

背景技术

黄瑞香(Daphne giraldii Nitsche)为瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香属(DaphneL.)植物。落叶直立灌木，分布于中国黑龙江、辽宁、陕西、甘肃、青海、新疆、四川等省区。生长于海拔1600-2600米的山地林缘或疏林中。其根皮和茎皮入药，是祖师麻的重要基源植物之一，主治跌打损伤、风湿及类风湿性关节炎等症状，疗效显著，为民间传统常用中药。

乙酰胆碱酯酶(AChE)可以水解乙酰胆碱(ACh)以终止胆碱能突触的脉冲传递，存在于胆碱能脑突触和神经肌肉接头。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种主要发生在老年人中的神经退行性疾病。随着人口老龄化的加剧，AD的发病率逐年上升。通过增加神经系统中乙酰胆碱的水平来预防AD是最常见的方法之一，这意味着可以通过降低AChE水平来预防AD。乙酰胆碱酯酶抑制剂的使用是提高大脑乙酰胆碱水平的最有前景的方法之一，可用于阿尔茨海默病和相关神经退行性疾病。

发明内容

本发明的目的在于提供从瑞香科瑞香属植物黄瑞香(Daphne giraldii Nitsche)的根皮和茎皮中分离得到的3个三萜类化合物，并提供该类三萜类化合物的提取、制备方法，还提供其在抗阿尔兹海默方面的用途。所述三萜类化合物结构式为：

所述黄瑞香中的三萜类化合物的制备方法，具体包括以下步骤：

取黄瑞香干燥根皮、茎皮以工业乙醇加热回流提取，合并提取液浓缩得浸膏，所得浸膏用水混悬，用乙酸乙酯萃取3-4次，萃取后的水层用正丁醇萃取3-4次，将所得乙酸乙酯层和正丁醇层去除溶剂后的干浸膏分别经硅胶柱色谱，均以二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，将所得流份进行交叉合并后共得到5个流份Fr.1-Fr.5；

流份Fr.1经聚酰胺柱色谱，以乙醇-水为洗脱剂梯度洗脱，得到流份Fr.1.1、Fr.1.2，其中流份Fr.1.2经HP20柱色谱以乙醇-水系统进行梯度洗脱，经硅胶薄层检识和HPLC分析合并后得到4个流份Fr.1.2.1、Fr.1.2.2、Fr.1.2.3、Fr.1.2.4；

Fr.1.2.1、Fr.1.2.2、Fr.1.2.3分别经ODS柱色谱以乙醇-水系统进行梯度洗脱，经硅胶薄层检识和HPLC分析进行合并共得到7个流份Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D、Fr.E、Fr.F、Fr.G；

利用制备HPLC对Fr.A、Fr.B以甲醇-水系统53:47进行分离，得到15个组分；

利用半制备HPLC对上述15个组分以乙腈-水系统40:60进行洗脱，得到化合物1-3。

所述的制备方法中，采用的黄瑞香的根皮和茎皮来自瑞香科瑞香属植物黄瑞香(Daphne giraldii Nitsche)。

所述的制备方法中，黄瑞香干燥根皮、茎皮以70-80％工业乙醇回流提取2-3次；二氯甲烷-甲醇系统的梯度为50:0-3:1。