[发明专利]胞嘧啶脱氨酶、包含其的碱基编辑系统及其应用

权利要求书

1.一种胞嘧啶脱氨酶，其特征在于，所述胞嘧啶脱氨酶包含与如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的氨基酸序列。

2.一种多肽复合物，其特征在于，所述多肽复合物包括第一多肽和第二多肽；

其中，所述第一多肽包含与如SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列具有至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的氨基酸序列；所述第二多肽包含与如SEQ IDNO:30所示的氨基酸序列具有至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的氨基酸序列；

可选地，所述第一多肽与第二多肽连接。

3.一种融合蛋白的组合，其特征在于，所述融合蛋白的组合包括第一融合蛋白和第二融合蛋白；所述第一融合蛋白包括第一多肽和第一核酸酶，所述第二融合蛋白包括第二多肽和第二核酸酶；

其中，所述第一核酸酶与所述第二核酸酶在DNA链上产生断裂；所述第一核酸酶与所述第二核酸酶的识别位点不同；所述第一多肽与第二多肽在结合状态下将胞嘧啶编辑为胸腺嘧啶；

较佳地，所述第一核酸酶与所述第二核酸酶选自VQR-spCas9、VRER-spCas9、spRY、spNG、SaCas9-KKH和SaCas9-NG。

4.如权利要求3所述的组合，其特征在于，所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白还包括核定位信号序列片段；

和/或，所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白还包括尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂片段；

和/或，所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白还包括转录激活结构域片段；

较佳地：

所述核定位信号序列片段位于所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白的N端和/或C端；和/或，所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂片段位于所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白的C端；和/或，所述转录激活结构域片段位于所述第一融合蛋白和/或第二融合蛋白的C端；和/或，所述核定位信号序列片段、所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂片段和所述转录激活结构域片段与所述第一多肽、第二多肽、第一核酸酶和/或第二核酸酶通过连接子连接；

更佳地：

所述第一融合蛋白自N端至C端依次包括：核定位信号序列片段、第一多肽、第一核酸酶、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂片段、核定位信号序列片段和转录激活结构域片段；和/或，

所述第二融合蛋白自N端至C端依次包括：核定位信号序列片段、第二多肽、第二核酸酶、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂片段、核定位信号序列片段和转录激活结构域片段。