[发明专利]一种红米米糠非淀粉多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种红米米糠非淀粉多糖的制备方法，属于多糖提取技术领域。本发明的红米米糠非淀粉多糖的制备方法包括如下步骤：采用碾米机碾磨红米米糠，无水乙醇除脂；热水浸提；利用大孔吸附树脂除去色素，Sevag溶液除去蛋白质；然后再利用乙醇沉淀多糖，复溶后透析除去单糖、寡糖等小分子杂质；利用DEAE 52Cellulose进一步分离纯化多糖组分，各组分透析脱盐、冻干后即得到高纯度的红米米糠非淀粉多糖。该方法可在糖链结构上最大程度的保护多糖的糖链完整性，获得高产率的万级重均分子量的红米米糠多糖；丰富红米米糠多糖的应用途径。

技术领域

本发明涉及一种红米米糠非淀粉多糖的制备方法，属于多糖提取技术领域。

背景技术

红米是我国产量最高的有色米，红米中的总酚、蛋白质、黄酮类物质、γ-氨基丁酸等活性物质的含量显著高于白米，具有提高机体抗氧化力、改善动脉粥样硬化、降低胆固醇、抗癌、降血糖、减肥、抗炎等作用。

植物多糖具有一定的抗氧化性、降血糖、降血脂作用，是一种天然的具有生理活性的物质，且目前已经证实米糠多糖的抗氧化、抗肿瘤、降血糖等生理活性。红米米糠资源丰富，研究其多糖提取纯化方法、解析多糖结构与功能、拓宽多糖的应用渠道十分必要。

在进行红米米糠多糖结构与生理活性的研究与红米多糖的实际应用时，需要尽可能减少对于多糖链状结构中的糖苷键、基团等的破坏，一是为了增加红米米糠多糖应用途径，多糖发挥不同生理活性的结构有所差别，根据应用的目的，既可以利用较完整的红米米糠多糖，又可以利用酶等手段对多糖进行特异性降解，从而得到特定的多糖片段，以达到相对应的使用目的；二是有利于对红米米糠多糖的初始结构与生理活性进行解析，为了使提取出的多糖的结构和功能，更接近其存在于红米中原始形态，通过实验尽可能地还原其在红米中的原始结构和生物活性，从而探究红米米糠非淀粉水溶性多糖对红米生理活性的贡献；三是提高多糖产率，多糖以较大的分子量存在，在相同的醇沉、透析条件下，更多的多糖留存于样液中，多糖产率增大。但是在提取、纯化过程中就加入超声、酶等辅助手段，会导致多糖的分子量发生锐减，在相同的醇沉条件下有部分多糖无法沉淀，在相同的透析条件下，部分多糖碎片会游离出透析袋外，造成产率降低。

现有技术中多糖的提取方法涉及超声辅助提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取等方法，而超声波实际上是一种多糖降解手段，极易使得多糖链断裂。酶辅助提取法中的淀粉酶会对“Glc-(1,4)-Glc”结构具有裂解作用，使得含有此类结构的多糖链发生断裂；难以获得万级分子量以上的多糖组分。

发明内容

[技术问题]

现有技术红米米糠非淀粉多糖提取过程中容易造成的糖苷键断裂、多糖链断裂，造成多糖碎片无法醇沉、被透析除去等，导致多糖信息丢失、产率较低、应用受限的问题。并且还存在纯化步骤不完全造成的多糖纯度不高，或操作方法不当，对多糖链造成二次降解，影响结构表征、生理活性研究与实际应用的问题。

[技术方案]

为了能同时兼顾降低对多糖链的降解作用、多糖的高纯度与高产率，同时减少不必要的步骤降低成本与制样时间，本发明提供了一种红米米糠非淀粉多糖的制备方法，具体是采用热水浸提红米米糠水溶性多糖，旨在降低剧烈的提取方式对于多糖链状结构的降解破坏作用，同时经过热水提取、脱色、除蛋白、透析、阴离子交换柱层析分离纯化、透析脱盐、冻干得到高纯度的红米米糠非淀粉水溶性多糖组分；其中，为保证多糖产率准确性与多糖的高纯度，本发明将透析操作贯穿于多糖的纯化步骤中，在利用盐溶液洗脱阴离子交换柱后，多糖溶液中也存在着大量的盐类，使得多糖的有效浓度降低，透析有利于除去样品中的盐类，提高样品浓度。

本发明的目的是提供一种红米米糠非淀粉多糖的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)红米米糠粉碎、脱脂、烘干、过筛；

(2)将步骤(1)过筛后的红米米糠与水混合在50℃～90℃恒温条件下浸提，离心、取上清液旋蒸浓缩；