[发明专利]促进干细胞外泌体分泌的培养液、外泌体制备及应用有效
申请号: | 202211435698.0 | 申请日: | 2022-11-16 |
公开(公告)号: | CN115491352B | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 谢海涛;薛卫巍;谢炜豪 | 申请(专利权)人: | 广东先康达生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61P1/16;A61K35/28;A61P37/00 |
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地址: | 523808 广东省东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 促进 干细胞 外泌体 分泌 培养液 体制 应用 | ||
1.一种促进间充质干细胞分泌外泌体的培养液,其特征在于,该培养液中包括基础培养基、重组人胰岛素5mg/L、人转铁蛋白7mg/L、重组人纤连蛋白31mg/L、人血清白蛋白3.2g/L、维生素C 100mg/L、维生素B6 12mg/L、维生素B1 110mg/L、维生素A 36mg/L、EGF 6μg/L、bFGF 15μg/L、β-巯基乙醇11mg/L、谷胱甘肽3mg/L及3umol/L的长梗秦艽酮。
2.根据权利要求1所述的培养液,其特征在于,所述基础培养基为a-MEM或DMEM。
3.一种间充质干细胞外泌体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
获取间充质干细胞;
将所述间充质干细胞接种至盛有培养液中的培养器中,进行静态培养;其中,所述培养液采用权利要求1或2所述的培养液;
培养结束后,对培养器中的培养液收集后进行离心处理,吸取保留上清液,获得间充质干细胞外泌体溶液。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞及胎盘间充质干细胞中的任一种。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述间充质干细胞的静态培养过程中,所述培养器内的O2浓度控制在5~8v/v%、CO2浓度为5 v/v%,温度控制在37℃,培养时间为96小时。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,离心处理时,离心力为1500~2500g,离心时间为8~15分钟。
7.一种如权利要求3至6任一所述制备方法制得的间充质干细胞外泌体溶液。
8.权利要求7所述的间充质干细胞外泌体溶液在制备人体机能免疫调节、预防或治疗肝脏疾病药物中的应用。
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