[发明专利]一种基于寡糖链检测肺癌的检测试剂、制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于寡糖链检测肺癌的检测试剂，其特征在于，由以下试剂组成：

试剂A：浓度为10mM、pH为8.3的碳酸氢铵溶液中加入质量浓度1～5％的SDS配制而成；

试剂B：由0.05～10单位/10μl糖胺酰酶、质量浓度10％的NP-40和浓度为10mM、pH为8.3的碳酸氢铵溶液混合配制而成，混合溶液pH值为5～9；

试剂C：由8-氨基芘-1,3,6-三磺酸溶于DMSO中配制成浓度为0.02mM～1M有机物还原剂；

试剂D：终止液。

2.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测肺癌的检测试剂，其特征在于，所述试剂A、试剂B与试剂C的体积比是1:1:1。

3.根据权利要求2所述的基于寡糖链检测肺癌的检测试剂，其特征在于，所述试剂A、试剂B与试剂C的体积都为5μl。

4.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测肺癌的检测试剂，其特征在于，所述试剂D为超纯水。

5.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测肺癌的检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一 寡糖链的制备

在经过灭活处理的5μl血清样品中加入5μl试剂A，进行变性，冷却至室温后，加入5μl试剂B，37℃反应3h，然后进行干燥；

步骤二 寡糖链的标记

在步骤一干燥后得到的样品中加入5μl试剂C，60℃反应1h后进行荧光标记，然后加入100μl试剂D终止标记反应；

步骤三 寡糖链分离分析

取10μl寡糖链标记后的液体，用分析仪进行N-寡糖链分离检测，得到天然寡糖N-糖组图谱；

步骤四 数据处理分析

N-糖组图谱的峰值量化：将每个峰的峰高值除以所有峰的高度的总和，计算得到每个峰的相对含量。

6.一种组合物在制备寡糖链肺癌检测试剂中的应用，其特征在于，所述组合物由血清中的G4S4、G3S3、G2S2、G2S2F、G2S1、G2S1F、G1F和G2F2组成，所述组合物通过G2S2+G1F的值来检测肺癌。

7.根据权利要求6所述的一种组合物在制备寡糖链肺癌检测试剂中的应用，其特征在于，所述G1F为同分异构体。