[发明专利]一种农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记及其引物和应用在审
申请号: | 202211400962.7 | 申请日: | 2022-11-09 |
公开(公告)号: | CN115896330A | 公开(公告)日: | 2023-04-04 |
发明(设计)人: | 高茜;张建荣;尹华群;米其利;赵蔚;张建铎;谷亚冰;杨文武;李振杰 | 申请(专利权)人: | 云南中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 北京维澳专利代理有限公司 11252 | 代理人: | 隋勤 |
地址: | 650231 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 农作物 白粉病 病原菌 广谱 分子 标记 及其 引物 应用 | ||
1.一种农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记,其特征在于,所述分子标记包括OG2127,所述OG2127的引物包括上游引物Og2127F和下游引物Og2127R,所述分子标记的引物的序列如下:
上游引物Og2127F,其核苷酸序列为:5’-ATY GKT GGM CCK TWY GC-3’,
下游引物Og2127R,其核苷酸序列为:5’-CTT TCR CCR CCR TCA AT-3’。
2.一种农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测植物叶部组织的微生物DNA;
(2)以上述提取微生物DNA为模板,利用权利要求1所述的分子标记的引物Og2127F和Og2127R进行PCR扩增;
(3)利用凝胶电泳技术检测PCR扩增产物;若得到112bp的特征条带,说明植物叶部组织的微生物检测到白粉病病原菌,若无,说明植物叶部组织的微生物未检测到白粉病病原菌。
3.根据权利要求2所述的农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记的鉴定方法,其特征在于,步骤(3)中,反应体系共10uL,10uL PCR反应体系包括:
2ng植物DNA,1×Taq酶缓冲液;2mmol·L-1MgCl2,0.2mmol·L-1dNTPs,上下游引物分别为2.5pmol·L-1和1U Taq DNA聚合酶,ddH2O补至10uL。
4.根据权利要求3所述的农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记的鉴定方法,其特征在于,步骤(3)中,PCR反应条件程序设置如下:
94℃预变性3min;94℃变性30s,50-55℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环;最后72℃延伸10min。
5.根据权利要求3所述的农作物白粉病病原菌的广谱性分子标记的鉴定方法,其特征在于,所述农作物白粉病病原菌来源于水培烟草。
6.根据权利要求1所述的分子标记在筛选农作物抗白粉病基因或农作物抗白粉病育种中的应用。
7.根据权利要求1所述的分子标记的引物在筛选农作物白粉病基因或农作物抗白粉病育种中的应用。
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