[发明专利]一种C反应蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种C反应蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。所述抗体的重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.9所示；所述抗体的轻链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.12所示。所述C反应蛋白单克隆抗体具备良好特异性和高亲和力，达到了全程CRP检测要求，与其他蛋白无交叉反应，能够作为捕获抗体，可有效应用于ELISA法中，且具备良好的检测线性、精密度、稳定性及准确度，在临床检测中具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种C反应蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。

背景技术

C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是一种结构为五聚体的急性蛋白，又称为Pentraxin1，主要由肝脏合成。从CRP的病理学意义角度而言，CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和发生损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要作用。当机体受到感染或出现组织损伤时血浆中CRP含量急剧增加，常常和白细胞、白介素、降钙素原(PCT)等炎症因子用于急性感染性疾病和组织损伤的辅助诊断。急性感染4～6h后CRP即明显释放，36～48h达到顶峰，其在血液中的半衰期大约为19h。CRP的显著和持续升高可作为细菌性脓毒症早期的炎症标志，其测定对于急性期炎症治疗的疗效判断具有较高价值。

CN112034178A公开了一种C反应蛋白检测试剂盒，所述C反应蛋白检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂；其中，所述第一试剂包括能够吸附C反应蛋白的微球体，所述第二试剂包括CRP抗体和白蛋白(Alb)。该试剂盒既可以检测低值样本中的CRP含量，又可以检测高值样本中的CRP含量，试剂盒的检测的灵敏度高、准确度高；同时该方案可以使用普通免疫比浊法的抗人C反应蛋白抗血清和少量微球，避免了胶乳比浊试剂配制过程中繁琐的偶联步骤，具有一定的成本优势。

CN107907690A公开了一种超敏C反应蛋白检测试剂盒及其使用方法，所述超敏C反应蛋白检测试剂盒包括：校准品、试剂R1、酶结合物工作液R2、磁珠结合物工作液M、清洗液及化学发光底物，所述试剂R1含有吡啶成分，可以快速消除全血中的血细胞，有效避免血细胞吞进磁珠的现象。该试剂盒将化学发光技术与免疫磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，并且采用了一步法反应模式，使得检测灵敏度和精密度大大提高；采用羧基磁珠作为固相载体，因其大小和形状的均一性，可使靶物质迅速且有效地结合在磁珠上，且其球形结构还可消除与不规则形状粒子有关的非特异性结合物，提高了试剂盒产品的特异性。

目前已经上市的用于CRP检测的试剂超过50种，质量参差不齐；而建立检测试剂科学、严谨、标准、规范的评价系统，需要使用标准品对CRP检测试剂进行质量控制和检测，因此需要建立标准参考物质。为了解决现有CRP检测试剂质量参差不齐的问题，研发一种特异性好、可重复性好、效价高，且与临床检测结果相关性好的C反应蛋白检测试剂及检测体系仍然是本领域的研究重点。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种C反应蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用，本发明筛选得到具备良好特异性的C反应蛋白单克隆抗体，并将其应用于ELISA检测C反应蛋白中，并具备良好的检测线性、精密度、稳定性以及准确度。

为达上述目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种C反应蛋白单克隆抗体，所述抗体的重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.9所示；所述抗体的轻链CDR3的氨基酸序列如SEQ IDNO.6或SEQ ID NO.12所示。

优选地，所述抗体的重链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.7所示，重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.8所示。