[发明专利]碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测的引物组、试剂盒与方法在审
| 申请号: | 202211361948.0 | 申请日: | 2022-11-02 |
| 公开(公告)号: | CN116064870A | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
| 发明(设计)人: | 杨启文;周艳琼;余祝君;余军伟;臧伟庆;尤其敏;林艺志 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院北京协和医院;杭州优思达生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/19;C12R1/22;C12R1/385;C12R1/01 |
| 代理公司: | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人: | 金方玮 |
| 地址: | 100005 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 青霉 耐药 基因 病原体 核酸 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测的引物组,其特征在于,所述的碳青霉烯耐药基因为OXA、KPC、VIM、IMP与NDM,所述的病原体为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌;试剂盒包括用于检测碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸的引物对与探针;
其中,OXA基因的引物对与探针分别如SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;
KPC基因的引物对与探针分别如SEQ ID NO.4,SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示;
VIM基因的引物对与探针分别如SEQ ID NO.7,SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示;
IMP基因的引物对与探针分别如SEQ ID NO.10,SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示;
NDM基因的引物对与探针分别如SEQ ID NO.13,SEQ ID NO.14和SEQ ID NO.15所示;
肺炎克雷伯菌的引物对与探针分别如SEQ ID NO.16,SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18所示;
大肠埃希菌的引物对与探针分别如SEQ ID NO.19,SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.21所示;
铜绿假单胞菌的引物对与探针分别如SEQ ID NO.22,SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24所示;
鲍曼不动杆菌的引物对与探针分别如SEQ ID NO.25,SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27所示。
2.碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测的引物组与CRE-全自动检测管。
3.根据权利要求2所述的碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测试剂盒,其特征在于,所述CRE-全自动检测管由上至下依次包括裂解-核酸结合磁珠区,多个磁珠-核酸清洗区与多个核酸洗脱-核酸扩增区。
4.根据权利要求3所述的碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的核酸洗脱-核酸扩增区包括反应区1,反应区2,反应区3以及反应区4,所述反应区1用于检测OXA、KPC与VIM,所述反应区2用于检测IMP,所述反应区3用于检测NDM、肺炎克雷伯菌与鲍曼不动杆菌,所述反应区4用于检测大肠埃希菌与铜绿假单胞菌。
5.根据权利要求4所述的碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测试剂盒,其特征在于,还包括内标,所述内标包括RNase P基因的引物对与探针,RNase P基因的引物对与探针如SEQ ID NO.28,SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30所示。
6.根据权利要求5所述的碳青霉烯耐药基因及4种病原体核酸检测试剂盒,其特征在于,还包括PCR buffer,20mmol/L dNTPs,热启动Taq酶与UDG酶。
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