[发明专利]EB病毒磁微粒化学发光检测试剂盒

权利要求书

1.试剂组合，其特征在于，包括酶结合物、样品稀释液和磁微粒悬液；

所述酶结合物为抗人IgM；

所述样品稀释液包括抗人IgG；

所述磁微粒悬液中的磁微粒包被有EB病毒衣壳抗原；所述抗原分子量为为125±10kD。

2.根据权利要求1所述的试剂组合，其特征在于，所述磁微粒悬液中EB病毒衣壳抗原的制备方法为：以EB病毒株侵染细胞，裂解侵染细胞并分离纯化得到EB病毒衣壳抗原。

3.根据权利要求1所述的试剂组合，其特征在于，

所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的抗人IgM；

所述样品稀释液的溶剂为PBS缓冲液，所述样品稀释液包括体积分数为1％～3％的抗人IgG；

所述磁微粒悬液的缓冲液为含有体积分数为20％～50％小牛血清的Tris缓冲液，所述磁微粒悬液中EB病毒衣壳抗原的工作浓度为10μg/mL～250μg/mL；所述磁微粒的直径为0.2μm～4μm，磁微粒的种类为羧基磁微粒。

4.根据权利要求1或3所述的试剂组合，其特征在于，

所述样品稀释液还包括体积分数为1％～5％的抗人IgA、体积分数为20％～50％的小牛血清、浓度为1mg/mL～5mg/mL的蛋白稳定剂和体积分数为0.5％～3％的防腐剂；所述蛋白稳定剂为多羟基糖类；所述防腐剂包括P300。

5.根据权利要求1～4任一项所述的试剂组合，其特征在于，所述磁微粒悬制备方法包括：在EDC溶液和NHS溶液活化后的磁微粒上包被EB病毒衣壳抗原，然后依次经终止液处理和封闭液处理后获得所述磁微粒悬浮液；

所述EDC溶液和NHS溶液活化的时间为0.5～2小时；

所述活化前还包括利用PBS缓冲液清洗的步骤，清洗次数为3～8次；

所述活化后还包括用MES缓冲液清洗的步骤，清洗次数为2～5。

6.根据权利要求5所述的试剂组合，其特征在于，所述磁微粒悬液制备方法中，

包被EB病毒衣壳抗原的条件为：18～28℃下震荡温育1～3小时；

终止液为含有体积分数为1％～5％PEG 8000的PBS缓冲液；终止液处理的条件为：25℃下震荡2小时；

封闭液为含蛋白保护剂的Tris缓冲液；所述蛋白保护剂为多羟基糖类；所述封闭液处理条件为：25℃下封闭3次，每次20min。

7.EB病毒的检测方法，其特征在于，其为利用权利要求1～6任一项所述的试剂组合进行样本EB病毒的检测。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤包括：将样品、样品稀释液和磁微粒悬液混匀，第一温育，加入酶结合物，第二温育，洗涤和加入发光试剂检测发光；

所述样品、样品稀释液、磁微粒悬液、酶结合物的体积比为10：1：2：10；

所述第一温育为37℃温育15分钟；

所述第二温育为37℃温育17分钟；

所述洗涤的试剂为pH 7.5～pH 8.5的PBS缓冲液；

所述发光试剂包括A液和B液；所述A液包括过氧化氢；所述B液包括鲁米诺。

9.EB病毒检测试剂盒，其特征在于，其包括校准品1、校准品0、和权利要求1～6任一项所述的试剂组合；

所述校准品1包括天冬氨酸钠盐和己灭活EB病毒衣壳抗原lgM抗体阳性人血清；

所述校准品0为EB病毒衣壳抗原IgM抗体阴性人血清。

10.根据权利要求9所述的EB病毒检测试剂盒，其特征在于，

所述的校准品1中，天冬氨酸钠盐的浓度为1mg/mL～5mg/mL；阳性人血清的S/CO值为1.75～3.25；

所述的校准品0中，阴性人血清的S/CO值＜0.1。